TCC - Biotecnologia

URI Permanente para esta coleção

https://dspace.unila.edu.br/handle/123456789/4339

ILACVN - Centro Interdisciplinar de Ciências da Vida - Bacharelado em Biotecnologia

Navegar

Agora exibindo 1 - 20 de 94

A proteína de choque térmico (HSP70) protege os espermatozoides bovinos dos danos causados pelo estresse oxidativo
(2025) Cruz, Lívia Padilha da
HSP70 é uma chaperona essencial para a homeostase celular, especialmente sob estresse oxidativo, condição que compromete funções espermáticas críticas. No entanto, seu papel na resposta do espermatozoide ao estresse oxidativo ainda não está totalmente esclarecido. Este estudo investigou a importância da HSP70 na qualidade espermática bovina sob estresse oxidativo. Para isso, espermatozoides coletados da cauda do epidídimo bovino foram lavados, ressuspendidos em TL-STOCK (5x106 espermatozoides/mL) e distribuídos em 4 grupos experimentais. (1) Controle, (2) VER (100 μM do inibidor de HSP70, VER-155008), (3) H2O2 (2% H2O2) e (4) H2O2 + VER (2% H2O2 + 100 μM VER-155008). Em seguida, os espermatozoides foram incubados por 2 horas a 38,5°C, 5% de CO₂ e alta umidade. Após a incubação, os espermatozoides foram processados para avaliação do estresse oxidativo (CellRox Green; 0,76 μM), da atividade mitocondrial (MitoTracker Red CMXRos; 0,76 μM) e da integridade da membrana acrossomal (FITC-PSA; 50 μg/mL) em microscopia de fluorescência. Os dados foram analisados estatisticamente pelo software SigmaPlot 14.0, com ANOVA seguida pelo teste de Tukey (p<0,05). O percentual de espermatozoides positivos para estresse oxidativo foi menor no grupo controle (16,7 ± 3,8%ᵃ) e aumentou progressivamente nos grupos VER (30,9 ± 3,4%ᵃᵇ), H₂O₂ (36,9 ± 4,2%ᵇ) e H₂O₂ + VER (52,7 ± 1,7%ᶜ). A porcentagem de espermatozoides com alta atividade mitocondrial foi significativamente reduzida pela inibição da HSP70 e pelo estresse oxidativo, com 76,3 ± 3,6%ᵃ no controle, 61,6 ± 3,7%ᵇ no VER, 60,3 ± 2,7%ᵇ no H₂O₂ e 46,9 ± 4,9%ᶜ no H₂O₂ + VER. A porcentagem de espermatozoides com a membrana acrossomal íntegra seguiu tendência semelhante, sendo maior no controle (53,0 ± 1,0%ᵃ), comparada ao VER (37,7 ± 0,3%ᵇ), H₂O₂ (36,7 ± 1,9%ᵇ) e ao H₂O₂ + VER (29,7 ± 0,9%ᶜ). Os achados do presente estudo evidenciam o papel central da HSP70 na homeostase espermática, especialmente em condições de estresse oxidativo. A inibição dessa chaperona intensificou significativamente os efeitos deletérios induzidos pelo peróxido de hidrogênio, refletindo-se no aumento da produção de espécies reativas de oxigênio, na disfunção mitocondrial e na perda da integridade. Esses resultados sugerem que a HSP70 exerce uma função citoprotetora nos espermatozoides, possivelmente mediando mecanismos de defesa celular contra o estresse oxidativo. Diante desses achados, conclui-se que a HSP70 não apenas desempenha um papel fundamental na proteção contra o estresse oxidativo, mas também contribui ativamente para a manutenção da qualidade espermática, regulando aspectos críticos como a atividade mitocondrial e a integridade da membrana acrossomal. Resumen HSP70 es una acompañante esencial para la homeostasis celular, especialmente bajo estrés oxidativo, una condición que compromete funciones críticas de los espermatozoides. Sin embargo, aún no se comprende completamente su papel en la respuesta de los espermatozoides al estrés oxidativo. Este estudio investigó la importancia de HSP70 en la calidad de los espermatozoides bovinos bajo estrés oxidativo. Para ello, los espermatozoides recolectados del epidídimo de la cola bovina fueron lavados, resuspendidos en TL-STOCK (5x106 espermatozoides/mL) y distribuidos en 4 grupos experimentales. (1) Control, (2) VER (inhibidor de HSP70 100 µM, VER-155008), (3) H2O2 (2 % H2O2) y (4) H2O2 + VER (2 % H2O2 + 100 µM VER-155008). Luego, los espermatozoides se incubaron durante 2 horas a 38,5°C, 5% de CO₂ y alta humedad. Después de la incubación, los espermatozoides se procesaron para evaluar el estrés oxidativo (CellRox Green; 0,76 μM), la actividad mitocondrial (MitoTracker Red CMXRos; 0,76 μM) y la integridad de la membrana acrosómica (FITC-PSA; 50 μg/mL) mediante microscopía de fluorescencia. Los datos se analizaron estadísticamente mediante el software SigmaPlot 14.0, con ANOVA seguido de la prueba de Tukey (p<0,05). El porcentaje de espermatozoides positivos para estrés oxidativo fue menor en el grupo control (16,7 ± 3,8%ᵃ) y aumentó progresivamente en los grupos VER (30,9 ± 3,4%ᵃᵇ), H₂O₂ (36,9 ± 4,2%ᵇ) y H₂O₂ + VER (52,7 ± 1,7%ᶜ). El porcentaje de espermatozoides con alta actividad mitocondrial se redujo significativamente por la inhibición de HSP70 y el estrés oxidativo, con 76,3 ± 3,6%ᵃ en control, 61,6 ± 3,7%ᵇ en VER, 60,3 ± 2,7%ᵇ en H₂O₂ y 46,9 ± 4,9%ᶜ en H₂O₂ + VER. El porcentaje de espermatozoides con membrana acrosómica intacta siguió una tendencia similar, siendo mayor en el control (53,0 ± 1,0%ᵃ), en comparación con VER (37,7 ± 0,3%ᵇ), H₂O₂ (36,7 ± 1,9%ᵇ) y H₂O₂ + VER (29,7 ± 0,9%ᶜ). Los hallazgos del presente estudio resaltan el papel central de HSP70 en la homeostasis de los espermatozoides, especialmente en condiciones de estrés oxidativo. La inhibición de esta chaperona intensificó significativamente los efectos nocivos inducidos por el peróxido de hidrógeno, reflejados en el aumento de la producción de especies reactivas de oxígeno, disfunción mitocondrial y pérdida de integridad. Estos resultados sugieren que HSP70 ejerce una función citoprotectora en los espermatozoides, posiblemente mediando mecanismos de defensa celular contra el estrés oxidativo. Ante estos hallazgos, se concluye que HSP70 no sólo juega un papel fundamental en la protección contra el estrés oxidativo, sino que también contribuye activamente al mantenimiento de la calidad del esperma, regulando aspectos críticos como la actividad mitocondrial y la integridad de la membrana acrosómica.
Ação antitumoral de extratos enzimáticos produzidos por fungos filamentosos isolados da Antártica.
(2024) Flores, Grecia Antonella Nina
A L-asparaginase é uma enzima amplamente utilizada no tratamento da Leucemia Linfoblástica Aguda (LLA) e na indústria alimentícia. No contexto terapêutico, sua ação envolve a inibição do crescimento de células tumorais ao reduzir a disponibilidade de asparagina no organismo. Atualmente, as enzimas utilizadas na terapia de LLA são produzidas por Dickeya chrysanthemi e Escherichia coli, porém, apresentam diversos efeitos adversos, que podem estar relacionados às atividades de glutaminase e urease. A bioprospecção em ambientes frios, como o continente Antártico, surge como uma alternativa promissora para a busca de enzimas com propriedades diferenciadas. Este estudo avaliou a produção de L-asparaginase por 39 fungos isolados de solo e madeira da Ilha Rei George, na Antártica, focando na obtenção de L-asparaginase livre de glutaminase e urease por 39 fungos isolados de amostras de solo e madeira da Antártica. Além disso, foram investigados os efeitos dos extratos fúngicos em células endoteliais microvasculares do cérebro humano (HBMEC), fibroblastos pulmonares humanos normais (MRC-5) e células de adenocarcinoma pancreático (MIA PaCa-2). Dos 39 fungos testados, três apresentaram produção apenas de L-asparaginase. Os fungos isolados de amostras de madeira, FM2.1 e FMR1.1, apresentaram os maiores índices enzimáticos. Os resultados do ensaio MTT mostraram que ambos os extratos fúngicos possuem um IC50 menor que o do extrato puro, e essa diferença é mais notável na linhagem celular cancerígena MIA PaCa-2 em comparação às outras linhagens não cancerígenas. Na análise de microscopia de fluorescência das MIA PaCa-2, foram observadas deformações no citoesqueleto e no núcleo das células tratadas com os extratos fúngicos em uma concentração de 50%, além de uma redução na quantidade de células, diferente do controle e da concentração de 20%. Esses resultados sugerem que a L-asparaginase produzida pelos fungos antárticos têm potencial para aplicação no tratamento de câncer pancreático, incentivando futuras pesquisas para aprofundar o conhecimento sobre a composição dos extratos e a caracterização enzimática.
Ação do β-Cariofileno sobre a viabilidade e proliferação de Fibroblastos
(2019-12-12) Lima, Mariana Mendoza de; Prudente, Arthur da Silveira
A pele é um órgão extremamente importante, com inúmeras funções biológicas e uma delas é nos proteger. Quando ocorre injúria neste tecido, a pele sofre vários processos biológicos, entre eles destaca-se o processo de inflamação, a proliferação e a reepitelização, no qual possuem como finalidade a cicatrização. Este trabalho de conclusão de curso, consiste em fazer uma breve pesquisa do potencial do agonista β-cariofileno, em ativar o receptor canabinóide 2 e assim melhorar o processo de cicatrização de feridas. A pesquisa será baseada em testes realizados in vitro em células fibroblásticas retiradas de pulmão de rato, de linhagem MRC-5. Durante os testes foi utilizado um método simples de MTT para avaliar a viabilidade e a proliferação das células MRC-5 quando em contato com diferentes tempos e concentrações do composto β-cariofileno. Observou-se que o agonista β-cariofileno possui a característica de reduzir o processo inflamatório, induzir a proliferação de fibroblasto, podendo melhorar o processo de reepitelização
Actividad celulolítica de hongos filamentosos aislados del Parque Nacional de Foz de Iguaçu – Brasil en sustratos agrícolas mediante la planificación experimental
(2020-03-04) Rodríguez Andachi, Anabel Alexandra; Santos, Rafaella Costa Bonugli; Passarini, Michel
Las celulasas son un conjunto de enzima hidrolíticas que descomponen la celulosa, mediante la actividad sinérgica de tres diferentes componentes, las endoglucanasa, exoglucanasa y la β -glucosidasa. A lo largo de los años estudios de celulasas han demostrado ser potencial biotecnológico en diferentes áreas, aplicada principalmente por ser biodegradables e inofensivas con el medio ambiente. Su producción es bastante estudiada en residuos agrícolas o agroindustriales. La creciente industrialización de estas áreas, ha llevado a la producción de altas cantidades de residuos que no son tratados adecuadamente. Siendo importante el aislamiento de microorganismos con potenciales celulolíticos. Esa posibilidad es brindada por la exploración del Parque Nacional Foz de Iguaçu que, por su biodiversidad vegetal, materia orgánica y minerales en el suelo, pudieron haber seleccionado microorganismos con potencial, diferentes a los ya descritos. Así, este trabajo tiene como objetivo evaluar el potencial de degradación de celulosa por fungos del PNI en sustratos agrícolas mediante planificación experimental. Y estudio previo de 30 fungos presentaron degradación de celulosa, determinado por la actividad, cuando cultivados en CMC sólido. Siendo así, fueron cultivados en CMC líquido y analizado bajo el protocolo Kit CellG5 cellulase assay Megazyme. El fungo Fusarium sp. CCLM CX presentó la mayor actividad enzimática (1,729 U CellG5/mL), el cual fue seleccionado para la evaluación frente a los sustratos naturales (salvado de trigo, salvado de avena, mazorca de maíz y aserrín). Para este estudio fue ejecutado una planificación experimental tipo fraccional 25-1. En sustratos naturales, la actividad enzimática del fungo CX fue menor que en CMC, ya que CMC está lista para el consumo metabólico, mientras que los sustratos tienen una composición compleja para el acceso al carbono. Por otro lado, los sustratos que tuvieron efecto significativo en el análisis estadístico fueron, el salvado de trigo y mazorca de maíz. Por los tanto, se deben realizar nuevos experimentos, con el fungo CX, conociendo el sustrato principal para la optimización enzimática. Las propiedades químicas de estos sustratos pueden ser aplicados principalmente como fuentes de producción de celulasas y aplicación en dieta animal o como biofertilizante, en regiones como Paraná.
Actividad Insecticida, Repelente y Larvicida de Extractos Vegetales en el Control de Aedes Aegypti: una Revisión Bibliográfica
(2021) Lima Bejar, Dianeth Sara; Orientação
El dengue junto a otras arbovirosis, es transmitida en las Américas principalmente a través del mosquito Aedes aegypti y actualmente representa uno de los más grandes problemas de salud pública siendo endémica en más de 30 países incluídos países latinoamericanos. Frente a la falta de tratamientos específicos para tratar las infecciones de dengue, los esfuerzos se han focalizado en el control del vector, aplicando diversas estrategias de combate, incluídas la aplicación de insecticidas y larvicidas para eliminar directamente la población de mosquitos, así como el uso de repelentes, como estrategia de protección individual. Los relatos de resistencia al combate químico por productos comerciales sintéticos, ha despertado la preocupación de los investigadores y población en general, además de los daños al medio ambiente y a la salud de las personas, esto justifica la demanda por la búsqueda de fuentes naturales como estrategias alternativas de control. El presente trabajo pretende discutir mediante las informaciones encontradas en la literatura, sobre las plantas y compuestos que presentaron mayores índices de eficacia para el control del vector. También se analizaron los métodos utilizados para evaluar la actividad insecticida, larvicida y de repelencia de diferentes extractos y aceites esenciales de plantas para el control de A. aegypti. La metodología de este estudio consistió en una revisión bibliográfica de publicaciones científicas indexadas sobre diferentes extractos o aceites esenciales de plantas con actividad insecticida, larvicida o de repelencia. Se tomaron valores de eficacia basados en el tipo de actividad descrita, principales compuestos presentes y metodología de experimentación. Los datos obtenidos, permitieron confirmar el potencial biotecnológico de los compuestos presentes en las plantas para el control del mosquito. Además se realizó un análisis sobre las dificultades encontradas al comparar los índices de eficacia para cada estudio revisado, lo que permitió evidenciar la necesidad de estandarización de la metodología de los experimentos realizados. De la misma manera, se vio la necesidad de definir los índices de eficacia para cada actividad a ser evaluada, con el fin de facilitar la evaluación comparativa de los diferentes extractos y/o aceites esenciales, reconocer sus principales compuestos y pasarlos a la fase aplicada en campo.
AMILASE E LIPASE PRODUZIDAS POR FUNGOS DE EFLUENTE TÊXTIL: LEVANTAMENTO CIENTÍFICO E TECNOLÓGICO
(2020-12-16) Jean-Baptiste, James; Orientação
A utilização de enzimas microbianas na indústria biotecnológica é uma ferramenta muito vantajosa em diversos setores industriais uma vez que, as enzimas podem ser obtidas por métodos mais simples, podem ser sintetizadas em grandes quantidades e em uma produção relativamente menos dispendiosa, podendo apresentar estabilidade em várias condições fermentativas. As enzimas de origem fúngica, podem ser consideradas predominantes em relação as enzimas bacterianas, característica que pode favorecer sua utilização em processos fermentativos em batelada bem como métodos extrativos operados em baixo custo. Este trabalho objetivou avaliar quantitativamente as publicações e patentes levantadas envolvendo amilases e lipases produzidas por fungos recuperados da indústria têxtil nos últimos 10 anos. Para isso, foi realizado um levantamento de publicações a partir das plataformas acadêmicas NCBI-Pubmed, Web of Science e Scopus, e de patentes, através dos escritórios de patentes do INPI, UPSTO e EPO, por meio do repositório Spacenet. Foram encontradas 238.382 patentes. Desse total, 142 foram originadas no INPI (0,06%), 43.801 (18,37%) no EPO e 194.439 (81,57%) emitidas no USPTO. Entretanto, nenhuma patente foi encontrada utilizando amilase e lipases produzidas por fungos de amostras têxteis. Para os últimos 10 anos, foram encontrados 136 artigos nas bases de dados, sendo que alguns dos artigos estão em mais de uma plataforma. Somente 30 desses artigos apresentam índice de impacto entre 1.0 e 2.5. Nenhum desses artigos mencionaram o uso de efluentes da indústria têxtil como fontes para bioprospecção de fungos produtores de amilases ou lipases. O presente estudo enfatiza a necessidade da busca das enzimas amilase e lipase oriundas de fungos recuperados de efluentes industriais têxteis para futuros estudos biotecnológicos.
Análise da Fitotoxicidade da Atrazina após Biodegradação Fúngica
(2022) Andretta, Alessandra; Orientação
A atrazina (ATZ) é um herbicida muito comum utilizado para o controle de plantas daninhas, porém é capaz de permanecer por longos períodos no solo e ambientes aquáticos. Uma das formas de remover a ATZ do ambiente é através da biorremediação, utilizando fungos e bactérias. No entanto, sua degradação pode gerar resíduos tóxicos, assim, é necessário a avaliação da toxicidade dos metabólitos gerados após a biodegradação. De acordo com a literatura, o pepino (Cucumis sativus) se mostrou um ótimo modelo vegetal para a análise da fitotoxicidade e foi selecionado, no presente trabalho, para a avaliação da toxicidade do processo de biodegradação da ATZ pelos fungos Clonostachys rosea CCMIBA_R018, Purpureocillium lilacinum CCMIBA_R014, e Bjerkandera sp. CCMIBA_R111, pertencentes à Coleção de Cultura de Micro-organismos de Importância Biotecnológica e Ambiental (CCMIBA). Os fungos foram reativados e cultivados em meio malte 2 % (MA2) na presença e ausência da atrazina (10 mg), por dez dias a 28 ºC. Após o crescimento, a biomassa foi quantificada (peso seco) e o sobrenadante separado para avaliação da toxicidade. As sementes de C. sativus foram pré-tratadas e cultivadas com cinco (5) ml de cada tratamento do fungo, em seguida, foram mantidas em temperatura ambiente, durante nove dias. O crescimento das radículas e hipocótilos foram mensurados para o cálculo da porcentagem de inibição (toxicidade). O peso seco da biomassa dos fungos C. rosea CCMIBA_R018 e P. lilacinum CCMIBA_R014 mostraram resultados favoráveis, sem alteração do crescimento. Já Bjerkandera sp. CCMIBA_R111 apresentou crescimento significativamente menor (p<0,05) na presença de ATZ, indicando sensibilidade ao herbicida. Da mesma forma, para os testes de toxicidade, o tratamento da ATZ por Bjerkandera sp. CCMIBA_R111 resultou na maior toxicidade (84,7 %), seguido por C. rosea CCMIBA_R018 (80,47 %), indicando, para esses fungos, possivelmente a formação de metabólitos tóxicos decorrentes da degradação. Enquanto, para P. lilacinum CCMIBA_R014 não houve toxicidade (0 %) do sobrenadante, indicando eficiência no processo de desintoxicação da ATZ. Apesar do resultado positivo do uso de C. sativus como indicador, nos testes sem ATZ (controles) identificamos, para alguns fungos, que a presença de metabólitos naturalmente produzidos pelos fungos pode interferir no crescimento das sementes, mostrando que C. sativus pode ser sensível à presença destes compostos fúngicos. Os resultados obtidos no presente estudo indicam que esses fungos possuem potencial para biorremediação da ATZ e que o uso futuro de um consórcio entre esses três fungos é uma promissora alternativa para a degradação completa deste poluente, e consequentemente, redução da sua toxicidade.
Análise da geração de biogás a partir da digestão anaeróbia de permeado de soro de leite bovino pré tratado e dejetos animais
(2025) Rodrigues, Heveli dos Santos
Diante da busca por combustíveis renováveis e do cenário crítico que o planeta passa atualmente em relação às mudanças climáticas, torna-se essencial adotar medidas mitigadoras. A gestão sustentável de resíduos agroindustriais, aliada ao potencial de produção de biogás, surge como uma solução promissora, convertendo desafios ambientais da pecuária em oportunidades para a geração de energia limpa e renovável. Nesse contexto, o presente estudo investigou a viabilidade da produção de biogás via digestão anaeróbia do permeado de soro de leite e dejetos animais, visando valorizar energeticamente resíduos agroindustriais e reduzir seu impacto ambiental. Para isso, buscou-se esterilizar o permeado por tratamento térmico, mantendo os dejetos como única fonte de inóculo, a fim de controlar parâmetros como acidificação do sistema e produção de H₂S. O estudo foi dividido em duas fases: a primeira consistiu na caracterização das amostras e no estabelecimento de parâmetros, incluindo a definição das condições de tratamento térmico; na segunda fase, os parâmetros pré-definidos foram aplicados e novas avaliações foram realizadas. Para isso, o permeado de soro de leite bovino foi submetido a tratamento térmico em banho-maria a 80°C e 95°C, seguido de plaqueamento em meio nutritivo ágar nutriente e ágar leite, com incubação a 37°C por 14 dias. Além disso, foram avaliados fatores físico-químicos e determinou-se a produção do biogás e metano de forma quantitativa e qualitativa. Os tratamentos térmicos demonstraram eficácia na redução da microbiota do efluente avaliado, sendo mais expressivos a 95°C. As análises físico-químicas indicaram uma redução nos sólidos voláteis (entre 88,46% e 88,73%) e no teor de sulfato (de 208 a 178 mg/L). Os níveis de DQO reduziram na amostra tratada a 80°C (131.525 mgO₂/L), mas aumentaram na a 95°C (142.925 mgO₂/L) em relação ao branco (141.925 mgO₂/L). Quanto à neutralização das amostras tratadas à 80°C e 95°C, estas ficaram nas faixas de 9 e 8,7, respectivamente. O potencial de produção de biogás variou de 741 ± 11,79 a 770 ± 4,76 LN kg⁻¹ SV, com incrementos de 0,54% e 4,48% nas amostras tratadas a 80°C e 95°C, respectivamente. Os teores de metano, superiores a 50%, apresentaram aumento de 6,95% na amostra tratada a 80°C e de 11,5% na tratada a 95°C. No entanto, a produção de H₂S também se intensificou, com elevação de 36% na amostra a 80°C e de 83,7% na a 95°C, atingindo picos de 1473,5 e 1990,5 ppm, respectivamente, de modo que esse aumento representa um desafio para a viabilidade da geração de biogás a partir do permeado de soro de leite bovino. Dessa forma, as intervenções propostas neste estudo resultaram em melhorias nos teores de biogás e metano, embora também tenham elevado os níveis de H₂S. Esse aumento pode estar relacionado à composição do substrato utilizado, rico em compostos sulfurados. Assim, reforça-se a necessidade de pesquisas contínuas para mitigar esse efeito indesejado, ao mesmo tempo em que se valoriza os resíduos agroindustriais como uma fonte energética sustentável. Resumen Ante la búsqueda de combustibles renovables y el escenario crítico que atraviesa actualmente el planeta en relación con el cambio climático, se vuelve esencial adoptar medidas mitigadoras. La gestión sostenible de residuos agroindustriales, aliada al potencial de producción de biogás, surge como una solución prometedora, convirtiendo desafíos ambientales de la ganadería en oportunidades para la generación de energía limpia y renovable. En este contexto, el presente estudio investigó la viabilidad de la producción de biogás vía digestión anaeróbica del permeado de suero de leche y desechos animales, buscando valorizar energéticamente residuos agroindustriales y reducir su impacto ambiental. Para esto, se buscó esterilizar el permeado por tratamiento térmico, manteniendo los desechos como única fuente de inóculo, a fin de controlar parámetros como acidificación del sistema y producción de H₂S. El estudio se dividió en dos fases: la primera consistió en la caracterización de las muestras y el establecimiento de parámetros, incluyendo la definición de las condiciones de tratamiento térmico; en la segunda fase, los parámetros predefinidos fueron aplicados y se realizaron nuevas evaluaciones. Para esto, el permeado de suero de leche bovino fue sometido a tratamiento térmico en baño maría a 80°C y 95°C, seguido de plaqueo en medio nutritivo agar nutriente y agar leche, con incubación a 37°C durante 14 días. Además, se evaluaron factores físico-químicos y se determinó la producción de biogás y metano de forma cuantitativa y cualitativa. Los tratamientos térmicos demostraron eficacia en la reducción de la microbiota del efluente evaluado, siendo más expresivos a 95°C. Los análisis físico-químicos indicaron una reducción en los sólidos volátiles (entre 88,46% y 88,73%) y en el contenido de sulfato (de 208 a 178 mg/L). Los niveles de DQO se redujeron en la muestra tratada a 80°C (131.525 mgO₂/L), pero aumentaron en la de 95°C (142.925 mgO₂/L) en relación con el blanco (141.925 mgO₂/L). En cuanto a la neutralización de las muestras tratadas a 80°C y 95°C, estas quedaron en los rangos de 9 y 8,7, respectivamente. El potencial de producción de biogás varió de 741 ± 11,79 a 770 ± 4,76 LN kg⁻¹ SV, con incrementos de 0,54% y 4,48% en las muestras tratadas a 80°C y 95°C, respectivamente. Los contenidos de metano, superiores al 50%, presentaron un aumento del 6,95% en la muestra tratada a 80°C y del 11,5% en la tratada a 95°C. Sin embargo, la producción de H₂S también se intensificó, con un aumento del 36% en la muestra a 80°C y del 83,7% en la a 95°C, alcanzando picos de 1473,5 y 1990,5 ppm, respectivamente, de modo que este aumento representa un desafío para la viabilidad de la generación de biogás a partir del permeado de suero de leche bovino. De esta forma, las intervenciones propuestas en este estudio resultaron en mejoras en los contenidos de biogás y metano, aunque también elevaron los niveles de H₂S. Este aumento puede estar relacionado con la composición del sustrato utilizado, rico en compuestos sulfurados. Así, se refuerza la necesidad de investigaciones continuas para mitigar este efecto indeseado, al mismo tiempo que se valorizan los residuos agroindustriales como una fuente energética sostenible.
Análise de Alterações no Gene TP53 em Portadores de Câncer de Mama na População de Missal-PR
(2021-08-09) Paula, Patricia Oliveira de; Orientação
O município de Missal, localizado no oeste do Paraná, apresenta uma possível incidência elevada de adoecimento oncológico, que culmina no fato do câncer ser a segunda causa de morte na região. Dentre os genes relacionados ao surgimento de cânceres destaca-se o gene TP53, que é um gene supressor tumoral, responsável por codificar a proteína p53, considerada guardiã do genoma por seu envolvimento na regulação do ciclo celular. Mutações nesse gene têm sido associadas com o aumento do risco do desenvolvimento de câncer, sendo que mutações somáticas são encontradas em até 50% dos cânceres humanos e mutações germinativas em até 10% dos carcinomas mamários. Para o câncer de mama, que é principal causa de morte por neoplasias em mulheres no mundo, a incidência de mutações no TP53 é baixa, mas tem grande significado clínico. Porém, considerando o contexto da cidade de Missal, onde uma possível incidência elevada de cânceres foi identificada, a sua análise é de extrema importância. Portanto, o objetivo do presente estudo foi identificar a prevalência de mutações nos éxons 5, 6, 7 e 11 do gene TP53 em pacientes (n=23) com câncer de mama no município de Missal - Paraná, por meio da técnica de sequenciamento de Sanger e classificar as variantes encontradas em sete bancos de dados genéticos, além de verificar se estas possuem contexto familiar e se estão relacionadas a mutações germinativas. Apenas três probandas apresentaram mutações nos éxons analisados, sendo que duas pacientes apresentaram a mesma mutação e uma paciente apresentou 2 mutações diferentes. As três mutações (13%) evidenciadas foram: c.599del, uma mutação patogênica localizada no éxon 6; c.745A>G e c.746G>A no éxon 7, ambas consideradas de significado incerto. A frequência de variantes encontradas corrobora com outros estudos na população brasileira, indicando que o câncer de mama da população de Missal não possui íntima relação com o gene TP53. Ainda, as mutações evidenciadas não apresentam contexto familiar, uma vez que apenas uma paciente portadora de mutação possui familiar com câncer. Análises subsequentes são sugeridas para confirmar os resultados encontrados e para investigar variações fora dos éxons analisados.
Análise de contaminação transgênica Bt em variedades crioulas de milho (Zea mays L.) de um microcentro de diversidade da espécie
(2025) Oliveira, Camila Vaz de
Existem normas de biossegurança para subsistência, a Instrução Normativa nº 4 delimita a distância necessária o isolamento dos cultivos geneticamente modificados GM com o intuito de evitar a contaminação genética. Este fator ameaça a agrobiodiversidade especialmente em microcentros de diversidade, onde a preservação é essencial. A contaminação genética por milho Bt é uma preocupação devido à sua dispersão do pólen. O presente estudo foi realizado no município de Anchieta - Santa Catarina, um microcentro de diversidade da espécie de milho Zea mays L., tendo como objetivo principal investigar eventos presença de contaminação de evento transgênico Bt e propor estratégias para cenários de contaminação, bem como a conservação das variedades crioulas. A metodologia adotada contempla entrevistas com dez agricultores rurais para caracterização socioeconômica, para a seleção das variedades crioulas cultivadas e teste de detecção da proteína Cry1Ab por meio do kit diagnóstico QuickStix (Envirologix). Como parte do estudo, também foi realizado um workshop apresentando estratégias de enfrentamento em caso de contaminação. Os resultados mostraram que a maioria dos agricultores é de homens idosos, com mais de 70 anos de experiência na região, embora a distribuição etária se mostrasse variada, possuindo pequenas propriedades (entre 5 e 10 hectares). O solo pedregoso e o estilo de manejo de propriedade familiar reforçam a necessidade de variedades adaptadas às condições locais. Foram dez variedades crioulas testadas, sendo que as mesmas foram obtidas em maior parte por trocas entre vizinhos e ações de entidades públicas. As variedades foram caracterizadas por ciclos de cultivo tardios e prolificidade variável, utilizadas para produção de farinha, alimentação animal e consumo doméstico. Em termos de contaminação genética, apenas a variedade Paulistinha indicou a presença da proteína Cry1Ab, evidenciando a vulnerabilidade dos métodos de isolamento, espacial e temporal. Estratégias adotadas pelos agricultores para mitigar o problema, como isolamento temporal (intervalos de 20 a 40 dias entre plantios) e isolamento espacial (distâncias acima de 400 metros), podem não ser medidas totalmente eficazes para a proteção. A partir das informações obtidas, dispõe-se a compreensão da dinâmica envolvendo as práticas, ressaltando dessa maneira a necessidade de políticas públicas que garantam a preservação das variedades crioulas e de formulações de estratégias de enfrentamento e conscientização. Resumen Existen normas de bioseguridad para la subsistencia, la Instrucción Normativa nº 4 define la distancia necesaria para el aislamiento de cultivos transgénicos geneticamente modificados a fin de evitar la contaminación genética. Este factor amenaza la agrobiodiversidad especialmente en los microcentros de diversidad, donde la conservación es esencial. La contaminación genética por maíz Bt es una preocupación debido a su dispersión de polen. El presente estudio se realizó en el municipio de Anchieta – Santa Catarina, microcentro de diversidad de la especie de maíz Zea mays L., con el objetivo principal de investigar eventos de contaminación por un evento transgénico Bt y proponer estrategias para escenarios de contaminación, así como la conservación de variedades criollas. La metodología adoptada incluye entrevistas a diez agricultores rurales para la caracterización socioeconómica, para la selección de variedades criollas cultivadas y prueba de detección de la proteína Cry1Ab utilizando el kit de diagnóstico QuickStix (Envirologix). Como parte del estudio también se realizó un taller donde se presentaron estrategias de afrontamiento en caso de contaminación. Los resultados mostraron que la mayoría de los agricultores son hombres de edad avanzada, con más de 70 años de experiencia en la región, aunque la distribución por edad fue variada, siendo propietarios de propiedades pequeñas (entre 5 y 10 hectáreas). El suelo pedregoso y el estilo de gestión agrícola familiar refuerzan la necesidad de variedades adaptadas a las condiciones locales. Se probaron diez variedades criollas, obtenidas en su mayoría mediante intercambios entre vecinos y acciones de entidades públicas. Las variedades se caracterizaron por ciclos de cultivo tardíos y prolificidad variable, utilizándose para producción de harina, alimentación animal y consumo doméstico. En términos de contaminación genética, sólo la variedad Paulistinha indicó la presencia de la proteína Cry1Ab, destacando la vulnerabilidad de los métodos de aislamiento, tanto espacial como temporal. Las estrategias adoptadas por los agricultores para mitigar el problema, como el aislamiento temporal (intervalos de 20 a 40 días entre plantaciones) y el aislamiento espacial (distancias superiores a 400 metros), pueden no ser medidas totalmente efectivas de protección. A partir de la información obtenida, se dispone de uma comprensión de la dinámica que involucra las prácticas, evidenciándose la necesidad de políticas públicas que garanticen la preservación de las variedades criollas y la formulación de estrategias para enfrentarlas y sensibilizarlas.
Análise de Proteína Sexo-Específica de Membrana de Células do Sangue, Provenientes do Cromossomo “W” De Gallus Gallus
(2021) Fabichaki, Sabrina Thais; Orientação
Nos últimos anos, a sexagem de animais e aves no Brasil e no mundo apresentou um grande destaque, principalmente no setor comercial, assim como na preservação. Apesar da grande importância da sexagem em aves, ainda a principal metodologia empregada é a realização do PCR (reação em cadeia da polimerase). Essa metodologia utiliza amostras de material biológico das aves enviadas via correio do criadouro até empresas de prestação de serviços, demandando tempo e burocracia. Diante deste cenário, o presente trabalho buscou realizar um levantamento de proteínas sexo-específicas em Gallus gallus presentes na membrana de células sanguíneas, utilizando diferentes ferramentas de bioinformática, visando a elaboração de teste de sexagem caseiro, a partir de análise de aglutinação usando amostras de sangue. Utilizando ferramentas de bioinformática gratuitas, como Ensembl, UniProt, Phobius e NCBI, bem como levantamento através da literatura, foram eleitas 11 proteínas de interesse buscando pelas seguintes características ideiais: (i) localização no cromossomo W; (ii) presença de domínio transmembrana e/ou presença na membrana celular; (iii) presença em hemácias ou glóbulos brancos, (iv) porcentagem baixa de homologias com outras sequências proteicas e entre sequências de mRNA de galinha, (v) porcentagem alta de homologia com sequências ortólogas de outras aves. A proteína predita 2 (Ensembl: ENSGALG00000047434) foi escolhida como a mais promissora para uso em técnicas de sexagem, por apresentar as seguintes características: i) presença no cromossomo W; (ii) proteína integral de membrana; (iii) possui no máximo 41,07% de homologia com outras proteínas da galinha; (iv) possui boa homologia (89,9%) com outras aves. Considerando o potencial de uso da proteína 2, foram desenhados pares de primers específicos, com base na sequência de mRNA de referência. Os próximos passos do presente projeto incluirão a extração de sangue de aves, preparo de amostras de RNA/cDNA e RT-PCR utilizando os primers específicos, para verificação da expressão do gene da proteína 2 em células do sangue de diferentes espécies de aves.
Analise do Desenvolvimento de Diferentes Variedades de Arroz Submetidas a Ação de 2 Tipos de Micorrizas Arbusculares
(2022) Guerra, Vitoria Gomes; Orientação
O arroz é um cereal muito importante na alimentação humana, a base alimentar de bilhões de pessoas no mundo, inclusive no Brasil. Contudo, a orizicultura brasileira enfrenta desafios que inviabilizam sua consolidação no mercado interno e mundial, como as características do clima e solo, trazendo a necessidade de mudanças que melhorem a adaptabilidade, a diminuição no uso de fertilizantes e herbicidas químicos, para gerar grandes safras. A partir disso, a biotecnologia tem ganhado espaço, ao trazer ferramentas que aumentem a produtividade e qualidade das plantações, tornando a produção não apenas mais rendável, mas também mais sustentável. A pesquisa com fungos micorrízicos arbusculares na cultura do arroz, demonstra grande potencial em beneficiar tanto a agricultura como o meio ambiente, isso porque a simbiose entre o fungo e o arroz aumenta a capacidade de sobrevivência, além de impactar positivamente no desenvolvimento e produtividade, pois o fungo aumenta a capacidade e absorção de nutrientes do solo. Com base nessa perspectiva, a pesquisa a que nos dedicamos nesse trabalho teve o intuito de avaliar os efeitos dessa parceria, para tal foram avaliados cinco diferentes cultivares de arroz: IRGA 424 RI, BRS Firmeza, BRS Pampa Cl, BRS Pampeira e IAPAR 58, submetidas a duas espécies distintas de micorrizas, Glomus formosanum e Rhizoglomus clarum. Foram avaliados tamanho de planta e tamanho de raiz, bem como peso seco de planta e de raiz. Tendo sido possível constatar benefícios de ambos os fungos, em especial o fungo Rhizoglomus clarum, nas variáveis radiculares, tanto no tamanho quanto peso das raízes de quatro dos cinco genótipos analisados. O comportamento dos diferentes genótipos nos permitiram observar potenciais ganhos em todas as variáveis, sendo dois deles detentores de melhores resultados, o genótipo BRS Firmeza e IRGA 242 RI. Tendo o genótipo IRGA 424 RI, apresentado vantagens claras ao ser inoculado por ambos os fungos.
Análise do potencial de biorremediação de fungos do Parque Nacional do Iguaçu frente a solos contaminados com atrazina.
(2024) Soares, Eduardo Augusto
O crescimento populacional tem gerado uma alta demanda por alimentos em escala global, resultando na necessidade de expandir a produção. Para garantir a segurança alimentar, há um aumento na área cultivada, o que, por consequência, leva ao uso intensificado de agrotóxicos. O Brasil, um dos maiores consumidores de agrotóxicos do mundo, enfrenta desafios decorrentes do uso intensivo desses produtos, como o esgotamento do solo, desmatamento e impactos na biodiversidade. Dentre eles está a atrazina, um agrotóxico altamente tóxico para o meio ambiente e com alta capacidade de acumulação no solo. Este cenário leva à necessidade de se desenvolver produtos e processos que diminuam os impactos ambientais. Desta forma, o objetivo do presente trabalho é avaliar o potencial dos fungos do Parque Nacional do Iguaçu no processo de biorremediação, de forma ex situ, de solo contaminado com atrazina, através da variação final do herbicida em relação a concentração inicial, isso em diferentes dias de inoculação dos fungos. O estudo envolveu a coleta e preparo de solo do Parque Nacional do Iguaçu, com a obtenção de cinco amostras de solo de três locais distintos. No laboratório, elas foram homogeneizadas, peneiradas para remover materiais estranhos e combinadas em uma única amostra composta. Os fungos Fusarium sp._GU e Fusarium sp._GW, pertencentes à Coleção de Cultura de Micro-organismos de Importância Biotecnológica e Ambiental (CCMIBA) da UNILA, caracterizados anteriormente e obtidos dos mesmos locais da presente coleta, foram usados no estudo de degradação da atrazina. Sete tratamentos foram realizados, incluindo cultivos com e sem atrazina e controles abióticos, com adição de atrazina nas concentrações de 10 e 100 mg/L. Posteriormente, os resíduos de atrazina no solo foram extraídos com acetona e analisados por HPLC. Além disso, para avaliar o potencial de biorremediação, a biomassa fúngica foi interagida com meio líquido com solo e atrazina, por sete dias. A biomassa foi medida após filtração e secagem do material, para comparação do crescimento entre os tratamentos. Porém, após sete dias de cultivo, não houve indicação de crescimento usando solo como única fonte de carbono, isto, tanto em meio líquido, contendo solo, quanto nas avaliações feitas diretamente no solo contaminado com o agroquímico. Neste segundo caso, ..... A eficiência da biodegradação fúngica parece depender amplamente das condições do ambiente, sendo mais eficaz em meios sólidos, para otimizar o processo, é necessário adicionar nutrientes, pois a atrazina sozinha não sustenta o crescimento fúngico. Estudos in situ são importantes para confirmar a eficiência dos fungos em ambientes reais, possibilitando a recuperação mais rápida de solos contaminados e beneficiando os agricultores e o próprio meio ambiente.
Análise dos Efeitos Tóxicos do Extrato da Hidrólise Ácida da Agave Sisalana Perrine (Ehaas), em Linhagens Celulares de Melanoma Metastático
(2020-07-24) Favato, Rafaela; Orientação
O câncer é uma doenças que mais afetam a população mundial, sendo o câncer de pele um dos mais frequentes, com mais de 80.000 novos casos por ano. O subtipo melanoma é o mais letal com taxa de mortalidade até 75% e dentre fatores genéticos e ambientais que influenciam o seu desenvolvimento, o mais relevante a exposição à radiação ultravioleta (UV). Os tratamentos disponíveis para o melanoma metastático apresentam taxa de resposta inferiores a 15%, e severos efeitos colaterais. A prospecção de novas substâncias terapêuticas tem sido cada vez mais necessária e os fitoterápicos despontam como potenciais adjuvantes em terapias oncogênicas. Nesse sentido, avaliamos os efeitos tóxicos do extrato da hidrólise ácida da espécie vegetal Agave sisalana Perrine (EHAAS), rico em saponinas, e da ciclofosfamida (CP) em células de melanoma metastático (A2058 e SK-MEL-5) e em células controle, de fibroblasto normal de pulmão (MRC5). Nossos resultados demonstraram que o background genético distinto entre as linhas de melanoma metastático, influenciam no perfil de respostas citotóxicas. Para tumores com o perfil mutacional da linhagem A2058, o EHAAS sobre concentrações menores que 50 µg/mL induzem a apoptose, frente a uma viabilidade de 80% das células controle. O potencial genotóxico também foi mais evidente em células de melanoma (A2058) quando comparadas as células controles (MRC5). Para tumores com o perfil mutacional da linhagem SK-MEL-5, a ciclofosfamida demonstrou um maior potencial citotóxico, enquanto o EHAAS desencadeia um processo necroapoptótico. Sugerimos que as vias de morte induzidas por EHAAS, na linhagem SK-MEL-5 possam estar intimamente ligadas a expressão de RIP1 e nfK-β. O tratamento com EHAAS na concentração de 100 µg/mL promoveu uma expressiva atividade citotóxica, porém com níveis de ROS estatisticamente semelhantes ao controle, reforçando atividade antioxidante do extrato. Estes resultados sugerem que o EHAAS poderia atuar como adjuvante no combate ao estresse oxidativo, intrinsecamente relacionada ao câncer. Esses dados reforçam ainda mais o papel da heterogeneidade neoplásicas de diferentes respostas terapêuticas observadas nos pacientes.
Análise genômica das variantes de SARS-CoV-2 detectadas em Foz do Iguaçu - Paraná/BR e o impacto das mutações missense nas vias dependentes de HLA-B
(2024) Assis, Samuel Chagas de
A vigilância genômica do SARS-CoV-2 tem sido fundamental para monitorar o surgimento de mutações e compreender suas implicações na severidade e disseminação do vírus, auxiliando na previsão de impactos na eficácia da vacinação e na resposta imune populacional. Neste estudo computacional, mapeamos as variantes de SARS-CoV-2 circulantes em Foz do Iguaçu, Paraná, Brasil, de 2020 a 2022. Focamos na identificação de mutações missense, que alteram a sequência de aminoácidos das proteínas virais, e avaliamos seu efeito na apresentação de epítopos, com ênfase nos alelos HLA-B da população local. Os resultados indicaram que epítopos associados aos alelos B*07:02 e B*27:05 apresentaram maior perda de ligação devido a mutações, e que a dinâmica de algumas variantes pode demonstrar a exportação de variantes ao Paraguai. Embora não tenha sido observada uma correlação direta entre o perfil alélico de pacientes internados em UTI e a circulação de mutações específicas, o estudo revelou a dinâmica mutacional do SARS-CoV-2 ao longo do tempo em Foz do Iguaçu durante a pandemia. Dessa forma, a pesquisa identificou mutações que potencialmente impactaram a disseminação do vírus e ofereceu um panorama das variantes circulantes, contribuindo para futuras estratégias de vigilância epidemiológica na região fronteiriça.
Análisis de la Toxicidad de la Atrazina después de Biodegradación Fúngica utilizando Caenorhabditis elegans
(2023) Beltrán Vargas, Eliana Gabriela
La actividad agrícola es una de las principales actividades que contaminan o degradan los suelos a causa de la utilización excesiva de sustancias químicas. Uno de los pesticidas más empleados en la agricultura es la Atrazina, debido a su amplio espectro, bajo costo y por presentar efecto residual en el suelo; así también, debido a sus características de solubilidad, adsorción, desplazamiento, persistencia y toxicidad, estos agrotóxicos presentan un gran potencial en contaminar los suelos, las aguas superficiales y subterráneas. En ese sentido, uno de los tratamientos es la biorremediación: actividad de biodegradación de los contaminantes, que usa las actividades metabólicas de ciertos organismos vivos para degradar, remover o transformar los contaminantes a productos metabólicos inocuos. Este trabajo buscó evaluar la efectividad del proceso de biodegradación fúngica de la atrazina utilizando Caenorhabditis elegans como modelo biológico. Para ello, fue utilizado los hongos de la Colección de Cultura de Microorganismos de Importancia Biotecnológica y Ambiental - CCMIBA, localizada en el laboratorio de Bioquímica y Microbiología de la UNILA, siendo: Clonostachys rosea CCMIBA_R018 y Purpureocillium lilacinum CCMIBA_R014. Los C. elegans fueron expuestos durante 1 h a los ensayos conteniendo los extractos metabólicos producidos con y sin atrazina (10 mg/L), seguidamente lavados, incubados y evaluados diariamente durante 5 días. Fue evaluado la toxicidad frente a la sobrevivencia, desarrollo larval, comportamiento y reproducción del nematodo. El número de bombeos faríngeos fue el único efecto significativo (p<0,05) en los ensayos con el hongo P. lilacinum CCMIBA_R014 en el aumento en relación al CN demostrando que los metabolitos secundarios son menos tóxicos y que la degradación de la atrazina deja la molécula menos tóxica. Los demás factores presentaron valores muy variables entre los dos hongos, incluidos los efectos que probablemente resulten de los metabolitos fúngicos secundarios, independientemente de la atrazina. Aunque los resultados hayan sido promisores, concluye que la concentración de atrazina no fue suficiente para un efecto toxicológico en C. elegans, por eso es sugerido más estudios para comprender mejor el mecanismo envueltos en la biodegradación fúngica de la atrazina, en C. elegans.
Análisis del Efecto in Vitro de Extractos de Cannabinoides en Fibroblastos MRC-5
(2023) Zepeda Rojas, Bruno Javier
La cicatrización es uno de los procesos de reparación más importantes del cuerpo, pues permite que el organismo se cure de lesiones que podrían volverse perjudiciales para la integridad del individuo. Los fibroblastos son células esenciales en el proceso de cicatrización debido a su rol en la síntesis de fibras de colágeno y otras proteínas de la matriz extracelular. Existe un creciente interés en el desarrollo de nuevas terapias que puedan auxiliar en la curación de heridas, pues algunos tratamientos convencionales generan efectos secundarios indeseados o no poseen gran efectividad. La planta Cannabis sativa es una de las más estudiadas actualmente, gracias a su gran variedad de propiedades medicinales. Se ha comprobado que los cannabinoides, moléculas producidas por la planta, poseen un alto potencial para inducir diversos efectos en las células del cuerpo humano; esto debido a la presencia del sistema endocannabinoide en tejidos a lo largo del organismo. El efecto de estos compuestos en fibroblastos ha sido poco estudiado, por lo que en el presente trabajo se analizó el efecto in vitro de un extracto de THC/CBD en fibroblastos MRC-5. Para esto, se llevó a cabo un ensayo de citotoxicidad con MTT, se elaboró una curva de crecimiento celular y un ensayo de migración. Los resultados del estudio revelaron que el extracto no presenta toxicidad en las células, factor importante para su utilización en el desarrollo de terapias. A pesar de que, estadísticamente, no se encontraron diferencias significativas en la tasa de proliferación celular cuando tratadas con el extracto, en todos los experimentos realizados los fibroblastos presentaron tendencia a una mayor proliferación. Estos descubrimientos son promisorios, pues abren las puertas a posteriores investigaciones donde se pueda comprobar de manera más completa dicho efecto en las células; abriendo el camino de posibles nuevas terapias para el tratamiento de heridas.
Avaliação da comunidade microbiana presente em digestatos produzidos em digestores anaeróbios a partir de diferentes resíduos suínos.
(2024) Maia, João Victor Pessoa
Diante dos desafios globais relacionados às mudanças climáticas e à escassez de recursos energéticos não renováveis, a exploração de fontes de energia sustentáveis é de fundamental importância na busca por fontes renováveis como o biometano. Este gás renovável é obtido a partir da conversão de resíduos orgânicos, oferecendo uma solução inovadora para atender às crescentes demandas energéticas e, ao mesmo tempo, reduzir o impacto ambiental. O digestato, um subproduto da biodigestão de resíduos orgânicos, é transformado em um biofertilizante inodoro e isento de microrganismo prejudiciais. Isso não apenas enriquece o solo, mas também promove a proliferação de bactérias fixadoras de nitrogênio, beneficiando a agricultura sustentável. Este trabalho teve como objetivo avaliar o potencial biofertilizante de amostras provenientes de dois biorreatores anaeróbios: o BLC (carcaça suína + efluente suíno) e o CSTR (efluente suíno). As análises físico-químicas e microbiológicas, bem como a avaliação da diversidade microbiana, mostraram diferenças entre os digestatos. O BLC apresentou maior diversidade microbiana, com índices de Shannon (7,6) e Simpson (0,9955), sugerindo que a presença de carcaça suína favoreceu o desenvolvimento de uma comunidade mais equilibrada e diversa, essencial para a produção de um biofertilizante. Espécies benéficas, como Bacillus sp. (2,2%), Paenibacillus sp. (1,5%) e Pseudomonas sp. (1,9%), foi encontradas em maiores quantidades no BLC, desempenhando funções importantes na promoção do crescimento vegetal, fixação de nitrogênio e solubilização de fósforo. No CSTR, embora as mesmas espécies estivessem presentes, suas proporções foi menores. A abundância de Methanoculleus no BLC (25,38%) foi maior que no CSTR (1-3%), devido à maior produção de hidrogênio e CO₂ no primeiro, destacando o papel fundamental dessas arqueias na produção de biogás. Além disso, o controle do pH mostrou-se crucial para maximizar a eficiência microbiana e garantir a qualidade do biofertilizante. Os resultados indicam que o digestato do BLC possui maior potencial como biofertilizante, com alta diversidade microbiana e gêneros promotores de crescimento. Entretanto, mais estudos são necessários para compreender a microbiota associada à biodigestatos em processos de digestão anaeróbios utilizando resíduos suínos.
Avaliação da produção de biológicos on-farm e seu papel no setor agrícola
(2023) Delgado, Nathália Felipe; Chagas de Souza, Nathália Corrêa
A crescente demanda por produtos agrícolas causou impactos no meio ambiente, com isso, começou-se a se desenvolver pesquisas quanto as alternativas no processo produtivo para o uso de microrganismos que atuam no fornecimento de nutrientes e no controle de pragas. Além da difusão e implementação de boas práticas, inclusive nos casos em que os produtores rurais passam a produzir seu próprio produto biológico, no sistema chamado On-Farm. Assim, o objetivo deste trabalho foi avaliar os sistemas de produção de produtos biológicos, de forma On-Farm, como alternativa sustentável para a agricultura. Para tanto, a metodologia constituiu em uma revisão da literatura, buscando nas plataformas online as palavras-chave: “Produção de microrganismos On-Farm”; “agricultura sustentável”;“Bacillus subtilis” e “Trichoderma”, além de uma combinação fatorial delas e de suas versões em inglês. Priorizou-se as publicações posteriores ao ano de 2018, encontrou-se 25 artigos que tratam diretamente sobre a produção On-Farm, os quais apontaram que esse processo ainda carece de profissionalização, porém a sua implementação é benéfica e possível, desde que as informações de cunho técnico-científico sejam corretamente utilizadas nesse meio produtivo. Além disso, foi possível perceber vantagens e desvantagens relacionadas ao processo, como menor custo final e maior sustentabilidade em relação aos produtos químicos e riscos de contaminação com patógenos e a necessidade de conhecimento técnico, por exemplo. Desta forma, estudos como estes se justificam pela necessidade da devida compilação dos dados, que podem contribuir para a melhor compreensão e estabelecimento do processo, especialmente em relação às boas práticas de manejo dos produtos biológicos. Assim, como uma forma de contribuir neste âmbito, foi elaborado, e está disponível neste estudo, um material de apoio, aqueles que tenham interesse pelo tema, com enfoque nos principais pontos que devem ser observados, para que se obtenha qualidade nos produtos On-Farm.
Avaliação da suscetibilidade ao antifúngico Anfotericina B (AmB) de fungos oportunistas isolados de ambientes impactados
(2025) Perdomo, Ingrid Leão
Os fungos representam um dos grupos de organismos mais diversos existentes e desempenham papéis cruciais na decomposição de matéria orgânica, ciclagem de nutrientes e na produção de medicamentos. No entanto, eles também podem atuar como patógenos de humanos e os fungos oportunistas, em particular, provavelmente evoluíram devido às pressões de seleção, permitindo assim o estabelecimento no hospedeiro mamífero. Contudo, esses organismos possuem uma capacidade de virulência inerente baixa e causam doenças em hospedeiros com um sistema imune enfraquecido. O tratamento de infecções fúngicas é desafiador devido à restrita diversidade de agentes antifúngicos, bem como ao aumento da resistência a esses medicamentos. As mudanças ambientais, como o aquecimento global e a poluição, contribuem para a propagação de fungos resistentes, o que representa um problema de saúde pública. Dessa forma, o presente trabalho avaliou a susceptibilidade de fungos oportunistas isolados de ambientes impactados por atividade antrópicas ao antifúngico Anfotericina B (AmB), com base na metodologia de referência E.DEF. 9.4 do European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) e analisou o impacto das alterações ambientais na possível aquisição de resistência dos fungos ao agente antifúngico. Foram avaliados 27 fungos filamentosos depositados na Coleção de Cultura de Microrganismos de Importância Biotecnológica e Ambiental (CCMIBA), isolados de sedimentos a partir de três pontos da região de Arroio Dourado, em Foz do Iguaçu, Paraná. O primeiro ponto de coleta (P1) está localizado antes do antigo lixão, influenciado pelas grandes áreas de cultivo de milho e soja; o segundo ponto (P2) está localizado após a região do antigo lixão e com grande influência de atividade antrópica, como assentamentos, moradias ilegais e descarte de esgoto doméstico sem tratamento; já o terceiro ponto de amostragem (P3) se localiza onde o córrego se junta ao Rio Tamanduá, onde seu fluxo aumenta substancialmente. A maioria dos fungos testados, 51,9%, apresentaram alta resistência à Anfotericina B. A média e a baixa resistência foram identificadas em 22,2% e 25,9% dos fungos, respectivamente. Esses resultados sugerem que, para a maioria dos fungos, é necessária uma concentração elevada de Anfotericina B para exercer uma ação antifúngica eficaz. Ao relacionar os resultados com os pontos de coleta, o P1 teve a maior contribuição para a alta resistência, 25,9%, seguido pelo P2 (14,8%) e pelo P3, que apresentou a menor contribuição para a resistência alta, 11,1%. Já em relação aos gêneros testados, os isolados do gênero Trichoderma apresentaram a segunda maior proporção de resistência alta (14,8%), seguidos por Aspergillus (3,7%) e Penicillium (3,7%). Além disso, a maior proporção para alta resistência (18,5%) foi observada em isolados ainda não identificados, o que destaca a importância da identificação taxonômica para compreender melhor os mecanismos de resistência. O trabalho evidenciou a capacidade de sobrevivência e adaptação dos fungos frente às pressões ambientais, cenário que ressalta a importância de desenvolver práticas mais sustentáveis, como a redução do descarte inadequado de contaminantes, uma vez que esses fatores podem contribuir para o desenvolvimento de cepas resistentes. Resumen Los hongos representan uno de los grupos de organismos más diversos que existen y desempeñan papeles cruciales en la descomposición de la materia orgánica, el ciclo de los nutrientes y la producción de medicamentos. Sin embargo, también pueden actuar como patógenos del ser humano y, en particular, los hongos oportunistas probablemente han evolucionado debido a presiones de selección, lo que les ha permitido establecerse en el hospedador mamífero. Sin embargo, estos organismos tienen una baja capacidad de virulencia inherente y causan enfermedades en huéspedes con un sistema inmunitario debilitado. El tratamiento de las infecciones fúngicas supone un reto debido a la restringida diversidad de agentes antifúngicos, así como al aumento de la resistencia a estos fármacos. Los cambios ambientales, como el calentamiento global y la contaminación, contribuyen a la propagación de hongos resistentes, lo que representa un problema de salud pública. Por lo tanto, este estudio evaluó la susceptibilidad de hongos oportunistas aislados de entornos afectados por actividades antropogénicas al fármaco antifúngico Anfotericina B (AmB), basándose en la metodología de referencia E.DEF. 9.4 del European Committee on Antimicrobial Susceptibility Testing (EUCAST) y se analizó el impacto de los cambios ambientales en la posible adquisición de resistencia fúngica al antifúngico. Se evaluaron 27 hongos filamentosos depositados en la Colección de Cultivos de Microorganismos de Importancia Biotecnológica y Ambiental (CCMIBA), aislados de sedimentos de tres puntos de la región de Arroio Dourado, en Foz do Iguaçu, Paraná. El primer punto de colecta (P1) está localizado antes del antiguo basurero, influenciado por grandes áreas de cultivo de maíz y soja; el segundo punto (P2) está localizado después del antiguo basurero y está fuertemente influenciado por la actividad antropogénica, como asentamientos, viviendas ilegales y eliminación de aguas residuales domésticas no tratadas; mientras que el tercer punto de muestreo (P3) está localizado donde el arroyo se une al río Tamanduá, donde su caudal aumenta sustancialmente. La mayoría de los hongos analizados, el 51,9%, mostraron una alta resistencia a la anfotericina B. Se identificó resistencia media y baja en el 22,2% y el 25,9% de los hongos, respectivamente. Estos resultados sugieren que, para la mayoría de los hongos, se requiere una concentración elevada de Anfotericina B para ejercer una acción antifúngica eficaz. Al relacionar los resultados con los puntos de recogida, P1 tuvo la mayor contribución a la alta resistencia, un 25,9%, seguido de P2 (14,8%) y P3, que tuvo la menor contribución a la alta resistencia, un 11,1%. En cuanto a los géneros analizados, los aislados del género Trichoderma presentaron la segunda mayor roporción de alta resistencia (14,8%), seguidos de Aspergillus (3,7%) y Penicillium (3,7%). Además, la mayor proporción de resistencias elevadas (18,5%) se observó en aislados que aún no habían sido identificados, lo que pone de relieve la importancia de la identificación taxonómica para comprender mejor los mecanismos de resistencia. El trabajo puso de relieve la capacidad de los hongos para sobrevivir y adaptarse a las presiones medioambientales, un escenario que subraya la importancia de desarrollar prácticas más sostenibles, como la reducción de la eliminación inadecuada de contaminantes, ya que estos factores pueden contribuir al desarrollo de cepas resistentes.

Navegar

Navegando TCC - Biotecnologia por Título

Resultados por página

Opções de Ordenação