TCC - Biotecnologia

URI Permanente para esta coleção

https://dspace.unila.edu.br/handle/123456789/4339

ILACVN - Centro Interdisciplinar de Ciências da Vida - Bacharelado em Biotecnologia

Navegar

Agora exibindo 1 - 20 de 81

Resistência a Antimicrobianos por Bactérias da Saliva de Cães da Cidade de Foz do Iguaçu
(2019) Gerke, Lígia Abboud; Passarini, Michel Rodrigo Zambrano
A presença de animais de estimação nas residências brasileiras é uma prática que vêm aumentando cada vez mais. Os cães são considerados animais que estão em contato muito próximo aos seus donos, consequentemente são transmissores potenciais de muitas doenças bem como possíveis micro-organismos resistentes a certos antibióticos comerciais. Bactérias do gênero Staphylococcus, Streptococcus, Neisseria, Actinomyces, Moraxella, Bacillus, bem como da família Enterobacteriaceae, foram encontrados na microbiota oral dos cães, segundo alguns estudos. Dentro desses gêneros existem bactérias patogênicas aos seres humanos, sendo sua presença na saliva de cães um risco tanto à saúde canina quanto humana. O conhecimento da presença de bactérias de importância clínica associadas à saliva de animais domésticos pode representar uma estratégia para avaliar os riscos de contaminação ao homem. Este trabalho teve como objetivo avaliar a resistência a antimicrobianos por bactérias isoladas da saliva de cães domésticos. De um total de sete amostras de saliva, doze linhagens bacterianas foram isoladas, pertencentes aos gêneros Staphylococcus, Escherichia, Streptococcus, Salmonella, Pseudomonas, Haemophilus e Enterococcus, utilizando meios de cultivo seletivos. A resistência aos antimicrobianos cloranfenicol, amoxicilina+clavulanato de potássio e azitromicina foi realizada através da técnica de disco-difusão. Linhagens de Escherichia coli, Streptococcus, Salmonella, Haemophilus e Pseudomonas apresentaram resistência ao antibiótico amoxicilina+clavulanato de potássio. Para Pseudomonas, foi possível observar resistência ao antibiótico cloranfenicol, enquanto que para azitromicina, obtivemos resultados discretos de resistência frente aos isolados Escherichia coli e Pseudomonas. Os resultados indicam que animais de estimação como os cães podem ser fontes de micro-organismos potencialmente patogênicos ao homem e que apresentam resistência á antibióticos comerciais, enfatizando assim, a necessidade de ser manter certa cautela na convivência com estes animais.
Degradação de Bisfenol a por Lacases Microbianas: uma Revisão Bibliográfica
(2019-06-02) Siqueira, Jhonatan Otto de Siqueira
O bisfenol A (BFA), [2′-bis-(4- hidroxifenil) propano], ou IUPAC 4,4′-dihidroxi-2,2-difenilpropano, é um dos xenobióticos emergentes mais comumente detectado em ecossistemas aquáticos e é produzido em grandes quantidades em todo o mundo. Tal molécula tem sido muito utilizada devido à gama de suas aplicações, especialmente como monômero na fabricação de resinas epóxi e plástico policarbonato, por exemplo. Essas resinas são a matéria-prima para a confecção de diversos tipos de mamadeiras e para algumas embalagens alimentícias. Contudo, esse composto representa um risco significativo de dano ao meio ambiente e à saúde humana e suscita, portanto, grande preocupação. No que diz respeito à degradação do BFA, o uso de microrganismos ou metabólitos produzidos por bactérias e fungos, como as enzimas extracelulares ligninolíticas, é uma alternativa viável em relação a métodos físico-químicos convencionais. Isso porque são de alta eficiência catalítica, baixa toxicidade, baixo tempo de reação e alta especificidade de substrato. Diversos fungos produzem enzimas ligninolíticas, como a lacase, em determinadas condições ambientais que apresentam potencial para degradar o BFA. As lacases estão entre as mais estudadas pois utilizam oxigênio molecular como aceitador final de elétrons, e são produzidas em concentrações mais significativas em fungos basidiomicetos. Este trabalho objetivou a revisão bibliográfica da biotecnologia recente aplicável a degradação do BFA utilizando a enzima lacase produzida por fungos. Foram selecionadas as palavras-chave “Fungi”, “Laccase”, “Bisphenol a” e “Purified”, e determinou-se para o estudo os artigos publicados no período de maior relevância das publicações. Foi realizada, também, uma comparação entre os resultados de estudos com lacase imobilizada ou livre, e purificada ou bruta. Com base na pesquisa o período de maior publicação foi entre 2016 a 2021. Nesse período foram identificados, nos bancos de dados analisados (Science Direct e PubMed), 116 artigos e apenas 14 deles descreveram no resumo a origem da enzima e então foram selecionados para avaliação na íntegra. O período de maior impacto das citações foi entre os anos 2018 e 2019 indicando a relevância temporal dessa linha de pesquisa. A fonte predominante de lacases foram basidiomicetos já que elas são produzidas em grandes quantidades nesses organismos. Nos estudos avaliados para tratar o BFA a concentração média ideal de lacase foi em torno de 1.280 U.L-1, e o tempo médio de reação ideal ficou em torno de 2h. O grupo de lacases brutas foi capaz de degradar uma quantidade maior de BFA em menor tempo e com menos enzima que o grupo de lacases purificadas. Visando à aplicação em processos de biorremediação de grandes volumes de água residual ou de poluente avaliou-se que lacases imobilizadas são preferíveis em tratamentos de BFA de longa duração e em larga escala enquanto a enzima bruta é preferível à purificada nesse tipo de estudo.
DNA metabarcoding da microbiota do chorume do aterro sanitário da cidade de Foz do Iguaçu-PR visando os processos de biorremediação
(2019-12-11) Moreira, João Victor Fonseca; Santos, Rafaella Costa Bonugli; Passarini, Michel Rodrigo Zambrano
O chorume é um composto tóxico, malcheiroso e de coloração escura produzido pelo depósito de resíduos sólidos urbanos (RSU) em decomposição. Ele possui uma alta carga de demanda química de oxigênio (DQO), compostos orgânicos xenobióticos tóxicos e metais pesados, com suas concentrações variando conforme questões socioambientais que modulam a produção de RSU. O depósito de RSU em lixões e aterros controlados podem causar a contaminação do solo e do lençol freático pelo chorume, o que pode resultar no consumo de água contaminada e impactos toxicológicos diretos aos seres humanos e animais, um grande problema socioambiental. Os aterros sanitários são construídos visando a captação de chorume e seu tratamento, diminuindo o impacto ambiental. Contudo, o chorume representa um resíduo sem destino correto e problemático para o gerenciamento dos aterros sanitários. Os microrganismos possuem grande flexibilidade e adaptação à ambientes extremos como o chorume, fato demonstrado pela grande diversidade de procariotos presente no chorume nos poucos trabalhos disponíveis na literatura até o momento. O tratamento biológico pode fazer uso desses consórcios microbianos presentes no chorume para sua estabilização e metabolização. Portanto, é necessário o entendimento dessas comunidades microbianas adaptadas para o desenvolvimento de métodos de biorremediação e seu aperfeiçoamento. O DNA metabarcoding é uma metodologia eficiente, rápida e de baixo custo para a caracterização de comunidade inteiras de microrganismos. Este trabalho objetivou a caracterização da microbiota do chorume do aterro sanitário da cidade de Foz do Iguaçu-PR através da técnica de DNA metabarcoding da região 16S. Para tanto foi realizado a extração do DNA total obtido a partir do chorume e o sequenciamento da região V3-V4 do gene 16S do RNAr. O processamento dos dados foi realizado pelo software QIIME2 através da pipeline proposta em etapas consecutivas de Manifest para importação de dados, deduplicação, definição de unidade taxonômica operacional (OTU) e atribuição taxonômica. A análise físico-química do chorume apresentou características mistas das fases ácida e metanogênica. As OTUs identificadas sugerem a dominância de bactérias fermentadoras do filo Firmicutes, com frequência relativa de 41,91%. Outros filos dominantes foram Proteobacteria, Bacteroidetes e Synergistetes. A maior diversidade foi encontrada nas sequências de baixa abundância, indicando grupos diversificados, porém com baixa representatividade, possivelmente com alguma função em determinados nichos ecológicos. A análise da diversidade indicou uma baixa abundância das arqueas metanogênicas e possivelmente a degradação do chorume nos reservatórios é realizada pelos gêneros dominantes através da digestão anaeróbia. O chorume apresentou grupos muito estudados no campo da biorremediação e estudos futuros devem avaliar a capacidade biorremediadora dos microrganismos isolados a partir do chorume.
Ação do β-Cariofileno sobre a viabilidade e proliferação de Fibroblastos
(2019-12-12) Lima, Mariana Mendoza de; Prudente, Arthur da Silveira
A pele é um órgão extremamente importante, com inúmeras funções biológicas e uma delas é nos proteger. Quando ocorre injúria neste tecido, a pele sofre vários processos biológicos, entre eles destaca-se o processo de inflamação, a proliferação e a reepitelização, no qual possuem como finalidade a cicatrização. Este trabalho de conclusão de curso, consiste em fazer uma breve pesquisa do potencial do agonista β-cariofileno, em ativar o receptor canabinóide 2 e assim melhorar o processo de cicatrização de feridas. A pesquisa será baseada em testes realizados in vitro em células fibroblásticas retiradas de pulmão de rato, de linhagem MRC-5. Durante os testes foi utilizado um método simples de MTT para avaliar a viabilidade e a proliferação das células MRC-5 quando em contato com diferentes tempos e concentrações do composto β-cariofileno. Observou-se que o agonista β-cariofileno possui a característica de reduzir o processo inflamatório, induzir a proliferação de fibroblasto, podendo melhorar o processo de reepitelização
Incidência da Toxemia da Prenhez em um Rebanho de Cabras submetido a Dois Manejos Nutricionais Diferentes
(2020) Utzig, Ingridy Liana Jung; Orientação
A toxemia da prenhez é uma doença metabólica que acomete, principalmente, cabras e ovelhas no terço final da gestação. É caracterizada por um desequilíbrio energético proveniente de uma queda drástica na concentração de glicose, situação que leva à mobilização intensa do tecido adiposo, o que acaba por aumentar extremamente os níveis de corpos cetônicos na circulação. As principais causas que levam ao transtorno são alimentação deficiente, estresse, maior demanda de glicose pelos fetos, condição corporal inadequada, entre outros. Quando manifestada, a doença apresenta taxas de mortalidade próximas de 90% e 100% das fêmeas. No presente estudo, buscou-se avaliar a incidência da toxemia da prenhez em dois grupos de cabras gestantes no terço final da gestação, submetidas a dois manejos nutricionais diferentes, em dois ciclos gestacionais. Examinou-se o comportamento destes animais, bem como sua resposta a cada manejo nutricional em termos de adaptação, palatabilidade, consumo e efeitos sob o organismo, principalmente na gestação e parto. Observou-se a ocorrência do transtorno somente no grupo A, alimentado com o manejo nutricional 1 (silagem de milho e ração a base de soja, milho e sal), alcançando a taxa de 30% neste grupo. O grupo B, alimentado com o manejo nutricional 2 (dieta 1 em diferente concentração com adição do insumo farelo de arroz e, em termos de volumoso conta com silagem de milho e feno ad libitum), não foi afetado. A mortalidade advinda da doença foi estimada em 41,7%. Avaliou-se as possíveis causas para a ocorrência da doença, entre elas a influência da alimentação, a condição corporal, a ordem de parto e a idade das cabras. Registrou-se o aparecimento de partos distócicos somente no grupo afetado pela toxemia, na taxa de 35%. No entanto, a associação entre a toxemia e os partos distócicos não foi significativa (p=0.0705), e a avaliação de concordância Kappa entre as duas variáveis apresentou resultado de 0.3182 (p=0.0428), indicando que outros fatores podem explicar a ocorrência da toxemia. Através dos resultados observados, sugere-se que a alimentação é um dos fatores primordiais para o surgimento da doença, mas acaba por não ser o único. Além disso, o ideal é sempre estar atento com o cuidado e o manejo dos caprinos, pois quando diagnosticada precocemente, a toxemia da prenhez pode ter seu quadro revertido.
Bioprospecção de fungo com potencial de biodegradação do Bisfenol A: avaliação da metodologia de seleção
(2020-01-05) Barcellos, Ema Carolina Almeida; Santos, Rafaella C. Bonugli
Uma grande quantidade de resíduos químicos industriais é gerada ao longo dos anos, sendo o bisfenol A (BFA) um dos resíduos de maior volume de produção atualmente em uso e faz parte da composição de diversos utensílios tais como: potes plásticos, garafas de água, revestimentos de proteção de embalagens, recipientes para alimentos e selantes em odontologia. Este composto pode gerar subprodutos tóxicos ao meio ambiente e a saúde humana, resultando na desregulação hormonal e efeitos mutagênicos. O presente projeto teve como objetivo avaliar metodologias viáveis para biodegradação do BFA a partir de linhagens isoladas do Parque Nacional do Iguaçu (PNI), um ambiente com características diferenciadas da composição do solo, de grande diversidade de espécies fúngicas e praticamente inexplorado. Inicialmente estudou-se qual o melhor método de diluição do BFA, uma partícula insolúvel em água. A menor concentração de solvente que permitiu a completa dissolução, mantendo suas características foi o etanol 10 %. Foi realizado o ensaio de toxicidade em Allium cepa visando avaliar a toxicidade do BFA para utilização como um bioindicador da biodegradação, entretanto, o método foi nocivo devido à presença do etanol 10 % na solução controle, o que descartou o efeito do solvente na toxicidade. A metodologia espectrometria UV-Vis foi otimizada identificando possíveis regiões de absorção entre 270 e 275 nm. Em adição, o crescimento fúngico (em peso seco) foi avaliado como método de seleção. Foram avaliados dois fungos: MD e EL na presença de 100 mg/L de BFA, sendo o MD o fungo selecionado para o ensaio de validação por apresentar o maior crescimento e a possível eliminação do BFA por via degradativa ou por adsorção. O fungo MD cultivado com apenas o BFA como fonte de carbono não obteve crescimento, necessitando de um meio que seja capaz de induzi-lo ao crescimento. Dessa forma, esse trabalho demonstrou boas perspectivas para a degradação desse resíduo em locais contaminados através dos fungos isolados do PNI, necessitando de novos ensaios para validar a metodologia de espectrometria, como uma análise cromatográfica
Potencial da produção de biogás a partir da codigestão de dejetos bovino e macrófita invasora (Hydrilla verticillata)
(2020-01-24) Rodrigues, Laryanne Naiara; Becker, Márcia Regina
A gestão e disposição inadequadas de dejetos bovinos podem causar a contaminação de corpos d'água, levando ao crescimento exacerbado de plantas aquáticas como a Hydrilla verticillata. Esta é uma macrófita invasora do Rio Paraná que, devido à sua alta capacidade de adaptação e dispersão, apresenta potencial para causar diversos prejuízos ambientais e econômicos. Aplicar um pré-tratamento biológico em biomassas lignocelulósicas pode melhorar a biodegradabilidade e facilitar a conversão destas em bioenergia. Diante disso, a biodigestão anaeróbia é uma importante ferramenta que possibilita o tratamento e aproveitamento energético de materiais orgânicos. A codigestão anaeróbia combina diferentes substratos e é uma estratégia promissora para otimizar a produção de biogás, no entanto, mais estudos são necessários sobre a viabilidade de utilizar novos substratos e prétratamentos. A adição do inóculo, uma população adicional de microrganismos já adaptada ao processo, também é recomendada para a otimização da biodigestão. Portanto, o objetivo deste trabalho foi avaliar o potencial da produção de biogás a partir da mono e codigestão de dejetos bovinos e H. verticillata. Uma solução tampão de bicarbonato de sódio (0,13 mol/L) foi utilizada para homogeneizar os substratos e ajudar a prevenir a acidificação do meio. Os substratos foram caracterizados mediante análise gravimétrica dos sólidos e a produção de biogás foi analisada através do Potencial Bioquímico de Metano (PBM). Na codigestão (razão 2:1 de dejeto:macrófita, respectivamente), foram analisados os efeitos da adição do inóculo e da aplicação de um pré-tratamento biológico na biomassa da H. verticillata. Após 40 dias de tempo de retenção hidráulica, o volume acumulado de biogás foi de 671mL e 1585 mL na monodigestão de dejeto e de macrófita, respectivamente; enquanto que, nos ensaios de codigestão obteve-se: 1120 mL (sem inóculo), 1173 mL (com inóculo) e 609 mL (com inóculo e macrófita pré-tratada). Portanto, a macrófita sem pré-tratamento biológico é um substrato adequado para a produção de biogás, seja como substrato único ou cossubstrato da biodigestão anaeróbia. Os ensaios utilizando a H. verticillata (sem pré-tratamento) resultaram no aumento de mais de 60% no volume de biogás produzido, em relação à monodigestão de dejetos. A adição do inóculo melhorou a biodigestão anaeróbia, acelerando a degradação da matéria orgânica, reduzindo o tempo de retenção hidráulica, antecipando o pico da produção de biogás e melhorando o conteúdo de metano
Actividad celulolítica de hongos filamentosos aislados del Parque Nacional de Foz de Iguaçu – Brasil en sustratos agrícolas mediante la planificación experimental
(2020-03-04) Rodríguez Andachi, Anabel Alexandra; Santos, Rafaella Costa Bonugli; Passarini, Michel
Las celulasas son un conjunto de enzima hidrolíticas que descomponen la celulosa, mediante la actividad sinérgica de tres diferentes componentes, las endoglucanasa, exoglucanasa y la β -glucosidasa. A lo largo de los años estudios de celulasas han demostrado ser potencial biotecnológico en diferentes áreas, aplicada principalmente por ser biodegradables e inofensivas con el medio ambiente. Su producción es bastante estudiada en residuos agrícolas o agroindustriales. La creciente industrialización de estas áreas, ha llevado a la producción de altas cantidades de residuos que no son tratados adecuadamente. Siendo importante el aislamiento de microorganismos con potenciales celulolíticos. Esa posibilidad es brindada por la exploración del Parque Nacional Foz de Iguaçu que, por su biodiversidad vegetal, materia orgánica y minerales en el suelo, pudieron haber seleccionado microorganismos con potencial, diferentes a los ya descritos. Así, este trabajo tiene como objetivo evaluar el potencial de degradación de celulosa por fungos del PNI en sustratos agrícolas mediante planificación experimental. Y estudio previo de 30 fungos presentaron degradación de celulosa, determinado por la actividad, cuando cultivados en CMC sólido. Siendo así, fueron cultivados en CMC líquido y analizado bajo el protocolo Kit CellG5 cellulase assay Megazyme. El fungo Fusarium sp. CCLM CX presentó la mayor actividad enzimática (1,729 U CellG5/mL), el cual fue seleccionado para la evaluación frente a los sustratos naturales (salvado de trigo, salvado de avena, mazorca de maíz y aserrín). Para este estudio fue ejecutado una planificación experimental tipo fraccional 25-1. En sustratos naturales, la actividad enzimática del fungo CX fue menor que en CMC, ya que CMC está lista para el consumo metabólico, mientras que los sustratos tienen una composición compleja para el acceso al carbono. Por otro lado, los sustratos que tuvieron efecto significativo en el análisis estadístico fueron, el salvado de trigo y mazorca de maíz. Por los tanto, se deben realizar nuevos experimentos, con el fungo CX, conociendo el sustrato principal para la optimización enzimática. Las propiedades químicas de estos sustratos pueden ser aplicados principalmente como fuentes de producción de celulasas y aplicación en dieta animal o como biofertilizante, en regiones como Paraná.
Avaliação da Taxa de Recuperação de Ovócitos Bovinos Obtidos por Aspiração Folicular de Ovários Oriundos de Abatedouro
(2020-07-10) Barreto Jara, Victoria Maria; Orientação
O sucesso na produção de bovinos é altamente dependente da capacidade reprodutiva das fêmeas de bovinos, diversos fatores podem influenciar ou interferir na reprodução animal. O uso de biotécnicas e tratamentos hormonais tais como a inseminação artificial (IA) e a produção in vitro de embriões (PIVE) contribuem significativamente para bovinocultura ao elevar a possibilidade de produção de bezerros geneticamente superiores a partir de doadoras com alta capacidade genética e com um considerável valor agregado. O objetivo desse trabalho foi avaliar a qualidade, morfologia e classificação dos ovócitos recuperados mediante aspiração folicular de ovários provenientes de abatedouros. Foram realizadas quatro coletas com média de 30 ovários por coleta e recuperados 661 ovócitos que foram classificados de acordo com a qualidade. Os melhores ovócitos, considerados viáveis foram separados e foi analisada a expansão das células do cumulus após 24 horas de cultivo em meio de maturação in vitro suplementado com hCG e FSH. Na última coleta foi recuperada uma maior quantidade de ovócitos quando comparada com as coletas anteriores. A recuperação de ovócitos de grau I nas coletas encontra-se em torno de 42,56 a 55,08%, destacando-se a segunda coleta com um total de 55,08% de ovócitos grau I. Observou-se que a qualidade dos ovócitos não se manteve a mesma em todas as coletas. A porcentagem de ovócitos grau I se manteve a mesma quando comparada com os demais graus de qualidade. Os resultados da avaliação da expansão das células do cumulus variam em torno de 78,79 a 93,31% nas diferentes coletas, não foi encontrada associação entre as coletas e a taxa de expansão, a mesma se manteve em todas as coletas. A efetividade da expansão das células do cumulus e a diferença na morfologia e qualidade dos ovócitos de grau I e demais graus de qualidade encontrados por coleta indicam que a aplicação dos mesmos para PIVE é de grande interesse na área de pesquisa a partir do aproveitamento do abate nos frigoríficos.
Análise dos Efeitos Tóxicos do Extrato da Hidrólise Ácida da Agave Sisalana Perrine (Ehaas), em Linhagens Celulares de Melanoma Metastático
(2020-07-24) Favato, Rafaela; Orientação
O câncer é uma doenças que mais afetam a população mundial, sendo o câncer de pele um dos mais frequentes, com mais de 80.000 novos casos por ano. O subtipo melanoma é o mais letal com taxa de mortalidade até 75% e dentre fatores genéticos e ambientais que influenciam o seu desenvolvimento, o mais relevante a exposição à radiação ultravioleta (UV). Os tratamentos disponíveis para o melanoma metastático apresentam taxa de resposta inferiores a 15%, e severos efeitos colaterais. A prospecção de novas substâncias terapêuticas tem sido cada vez mais necessária e os fitoterápicos despontam como potenciais adjuvantes em terapias oncogênicas. Nesse sentido, avaliamos os efeitos tóxicos do extrato da hidrólise ácida da espécie vegetal Agave sisalana Perrine (EHAAS), rico em saponinas, e da ciclofosfamida (CP) em células de melanoma metastático (A2058 e SK-MEL-5) e em células controle, de fibroblasto normal de pulmão (MRC5). Nossos resultados demonstraram que o background genético distinto entre as linhas de melanoma metastático, influenciam no perfil de respostas citotóxicas. Para tumores com o perfil mutacional da linhagem A2058, o EHAAS sobre concentrações menores que 50 µg/mL induzem a apoptose, frente a uma viabilidade de 80% das células controle. O potencial genotóxico também foi mais evidente em células de melanoma (A2058) quando comparadas as células controles (MRC5). Para tumores com o perfil mutacional da linhagem SK-MEL-5, a ciclofosfamida demonstrou um maior potencial citotóxico, enquanto o EHAAS desencadeia um processo necroapoptótico. Sugerimos que as vias de morte induzidas por EHAAS, na linhagem SK-MEL-5 possam estar intimamente ligadas a expressão de RIP1 e nfK-β. O tratamento com EHAAS na concentração de 100 µg/mL promoveu uma expressiva atividade citotóxica, porém com níveis de ROS estatisticamente semelhantes ao controle, reforçando atividade antioxidante do extrato. Estes resultados sugerem que o EHAAS poderia atuar como adjuvante no combate ao estresse oxidativo, intrinsecamente relacionada ao câncer. Esses dados reforçam ainda mais o papel da heterogeneidade neoplásicas de diferentes respostas terapêuticas observadas nos pacientes.
AMILASE E LIPASE PRODUZIDAS POR FUNGOS DE EFLUENTE TÊXTIL: LEVANTAMENTO CIENTÍFICO E TECNOLÓGICO
(2020-12-16) Jean-Baptiste, James; Orientação
A utilização de enzimas microbianas na indústria biotecnológica é uma ferramenta muito vantajosa em diversos setores industriais uma vez que, as enzimas podem ser obtidas por métodos mais simples, podem ser sintetizadas em grandes quantidades e em uma produção relativamente menos dispendiosa, podendo apresentar estabilidade em várias condições fermentativas. As enzimas de origem fúngica, podem ser consideradas predominantes em relação as enzimas bacterianas, característica que pode favorecer sua utilização em processos fermentativos em batelada bem como métodos extrativos operados em baixo custo. Este trabalho objetivou avaliar quantitativamente as publicações e patentes levantadas envolvendo amilases e lipases produzidas por fungos recuperados da indústria têxtil nos últimos 10 anos. Para isso, foi realizado um levantamento de publicações a partir das plataformas acadêmicas NCBI-Pubmed, Web of Science e Scopus, e de patentes, através dos escritórios de patentes do INPI, UPSTO e EPO, por meio do repositório Spacenet. Foram encontradas 238.382 patentes. Desse total, 142 foram originadas no INPI (0,06%), 43.801 (18,37%) no EPO e 194.439 (81,57%) emitidas no USPTO. Entretanto, nenhuma patente foi encontrada utilizando amilase e lipases produzidas por fungos de amostras têxteis. Para os últimos 10 anos, foram encontrados 136 artigos nas bases de dados, sendo que alguns dos artigos estão em mais de uma plataforma. Somente 30 desses artigos apresentam índice de impacto entre 1.0 e 2.5. Nenhum desses artigos mencionaram o uso de efluentes da indústria têxtil como fontes para bioprospecção de fungos produtores de amilases ou lipases. O presente estudo enfatiza a necessidade da busca das enzimas amilase e lipase oriundas de fungos recuperados de efluentes industriais têxteis para futuros estudos biotecnológicos.
Efeitos Tóxicos do Extrato de Hidrólise Ácida da Agave Sisalana Perrine (EHAAS) em Linhagens de Células Não Pequenas de Câncer de Pulmão
(2020-12-18) Teixeira, Michelli Ramires; Orientação
O câncer de pulmão é o câncer que mais mata no Brasil e no mundo. O subtipo mais prevalente do câncer de pulmão é o de células não pequenas (CPCNP), correspondendo a 85% dos casos. A elevada mortalidade do CPCNP se dá principalmente pelos diferentes perfis genéticos das células e resistência às terapias convencionais. Neste sentido, emerge a necessidade da prospecção de novas substâncias de interesse terapêutico. Frente a isso, a Agave sisalana Perrine (sisal) tem se mostrado um importante alvo de prospecção de novas moléculas, devido aos seus efeitos citotóxicos e antineoplásicos. Assim, avaliamos os efeitos citotóxicos, antioxidantes e genotóxicos do extrato de hidrólise ácida da Agave sisalana Perrine (EHAAS) nas linhagens de CPCNP A549 e NCI-H460 (ambas mutantes para KRAS) e também na linhagem saudável MRC-5 (controle). Nossos resultados demonstraram efeitos citotóxicos do EHAAS nas linhagens MRC-5 (p<0,0001; F=130,6) e A549 (p<0,001; F=1019), as quais apresentaram elevados percentuais de necrose. A linhagem NCI-H460 (p<0,0001; F=97,06), no entanto, se mostrou altamente quimiorresistente ao EHAAS. A atividade mitocondrial das linhagens A549 foi alterada em tratamentos com EHAAS na concentração de 400 μg/mL (p=0,0028), não sendo observada a depleção do potencial mitocondrial em nenhum outro tratamento nas demais linhagens (MRC-5: p=0,0951; NCI-H460: p=0,0806). A ação antioxidante do extrato foi observada nas linhagens MRC-5 (p<0,0001; F=84,45) e A549 (p<0,0001; F=1,786), diminuindo significativamente os níveis de ROS das células tratadas nas concentrações de 200 e 400 μg/mL. Para a linhagem NCI-H460, não foram observadas alterações significativas no estresse oxidativo (p=0,2659; F=1,416). Análises de genotoxicidade, por meio do ensaio de histona γ-H2AX, identificaram baixos efeitos genotóxicos do EHAAS e CP 100 μg/mL na linhagem controle (MRC-5). Os demais efeitos genotóxicos foram observados na linhagem A549, onde o tratamento com EHAAS a 50 μg/mL apresentou elevada genotoxicidade, e na linhagem NCI-H460, em que as células apresentaram alta sensibilidade ao tratamento com CP a 100 μg/mL. Nossos resultados sugerem que o EHAAS pode ter um papel importante na indução de vias programadas da necrose, i.e. necroptose, nas linhagens MRC-5 e A549 e que os efeitos antioxidantes do extrato nestas linhagens são responsáveis pela manutenção do equilíbrio do estresse oxidativo durante o processo de morte celular. Considerando os efeitos citotóxicos e presente genotoxicidade em células MRC-5 (controle), sugere-se uma administração do EHAAS, ou seus componentes, de forma direcionada a célula alvo. Mais investigações acerca das propriedades químicas e moleculares do EHAAS se mostram importantes, a fim de explorar suas propriedades terapêuticas em diferentes tipos de câncer e elucidar os efeitos do extrato in vitro.
Avaliação do Lisado de Plasma Rico em Plaquetas Canino como Substituto do Soro Fetal Bovino no Cultivo de Células-Tronco derivadas do Tecido Adiposo Canino
(2021) Alievi, Anderson Lucas; Orientação
As células-tronco adultas são notáveis pelo seu potencial no uso clínico em terapias celulares e na engenharia de tecidos humana e veterinária, incluindo em cães. Dentre as células-tronco adultas, as células-tronco derivadas do tecido adiposo (ASCs) apresentam vantagens devido à facilidade de extração, expansão in vitro e a potencial terapêutico. Entretanto, a maioria dos protocolos de expansão das ASCs in vitro envolve a utilização de meio de cultivo suplementado com soro fetal bovino (SFB). O SFB apresenta diversos problemas e sua substituição é desejável, principalmente no cultivo de células para terapias. Nesse contexto, o plasma rico em plaquetas (PRP) tem se mostrado como uma interessante alternativa, havendo, entretanto, poucos estudos, principalmente sobre cultivo de ASCs caninas (cASCs). No presente trabalho foi investigada a viabilidade da utilização do PRP canino como substituto do SFB na suplementação de meio de cultivo no processo de expansão e criopreservação de cASCs. Para isso, foram isoladas as cASCs de uma amostra de tecido adiposo canino e foram avaliados os efeitos e papéis do PRP (comparados à suplementação com SFB) sobre a: proliferação celular e tempo de dobramento celular, expressão de marcadores de membrana típicos de ASCs, expressão de marcadores moleculares relacionados à pluripotência, capacidade de diferenciação adipogênica, condrôgenica e osteogênica e, por fim, buscou-se avaliar o potencial da PRP como componente do meio de criopreservação, avaliando a viabilidade celular após descongelamento das cASCs. Em relação à proliferação celular e o tempo de dobramento, o PRP demonstrou sustentar um crescimento celular semelhante ao SFB, com um tempo de dobramento de 117 ± 24 horas e 103 ± 20 horas, respectivamente. A análise dos marcadores de membrana típicos de ASCs demonstrou que a expansão de cASCs com 10% de PRP não altera a presença de CD73, CD90 e CD105 em relação ao cultivo com 10% de SFB. A capacidade de diferenciação para as três linhagens se manteve igual entre os dois tratamentos. Além disso, o PRP se mostrou como um substituto viável ao SFB na composição de meio de criopreservação após 18 dias de congelamento, não demonstrado diferença estatística na viabilidade celular entre os dois tratamentos. Tais dados apontam que o PRP pode ser uma alternativa viável a utilização do SFB como suplementação no cultivo in vitro de ASCs caninas, demandando, todavia, investigações complementares.
Revisão Sistemática da Literatura do Potencial de Aplicação Biotecnológica das Algas
(2021) Ota, Ana Carolina Mayumi; Orientação
As algas são organismos fotossintetizantes diversificados que podem produzir metabólitos de alto valor agregado, podendo ser utilizados como ingredientes de uma infinidade de produtos biotecnológicos, que podem ser fundamentais para a vida do ser humano moderno. Este estudo teve como objetivo geral sintetizar os dados sobre espécies e gêneros de algas mais estudados do ponto de vista biotecnológico. Essa síntese de dados facilitará o acesso de potenciais espécies a serem utilizadas, bem como, evidenciar lacunas de conhecimento nos diferentes grupos de algas. Para tanto, foram levantados na literatura os trabalhos desenvolvidos com aplicações tecnológicas de algas nos últimos 20 anos em todo o mundo. A busca pelo material utilizado neste estudo iniciou em 2019 e foi finalizada em 2021 e para a encontrar trabalhos relevantes para o tema, os estudos científicos foram buscados no banco de dados Google Acadêmico e inicialmente, aplicou-se os seguintes descritores a partir de palavras-chave atribuídas a partir dos objetivos da pesquisa: biotecnologia das algas, algas com potencial biotecnológico, moléculas bioativas das algas, cosméticos a base de algas, algas na saúde, ágar a base de algas, biocombustíveis a partir de algas e algas na alimentação, etc. As combinações foram as mais variadas dentro da temática, de acordo com as palavras-chave. Os resultados alcançaram mais de 80 estudos, sendo que a busca por moléculas bioativas foi o principal foco dos artigos. No total, foi possível registrar 95 gêneros e 138 espécies de algas estudadas, a maior parte das espécies marinhas. Não obstante, a espécie dulciaquícola Chlorella vulgaris foi a espécie de alga com maior número de aplicações potenciais já registrada. Em conjunto os dados permitiram observar um grande interesse econômico e industrial focado no potencial biotecnológico das microalgas no planeta, principalmente devido à identificação de diversas substâncias sintetizadas por estes organismos, tendo destaque para as moléculas bioativas, que podem dar origem para os mais diversificados produtos biotecnológicos imagináveis.
Bioprospección de hongos del Parque Nacional do Iguaçu (Brasil) con actividad antitumoral.
(2021) Machado, Jessica Rosmary Romero
El presente trabajo estudió la biodiversidad fúngica del PNI seleccionando hongos aislados del suelo del Parque Nacional do Iguaçu con potencial para producción de compuestos antitumorales para aplicaciones en el campo de la oncología. En el estudio, se utilizaron líneas tumorales derivadas de tumores sólidos de páncreas, empleando células MiaPaca 2, en las que fueron realizadas pruebas de proliferación celular con el fin de determinar la disminución de la viabilidad celular, usando el ensayo de proliferación celular MTT (Bromuro de 3-(4,5-dimetiltiazol-2-il)-2,5-difeniltetrazolio) en Medio de Eagle modificado por Dulbecco (DMEM). Los hongos conservados en la Colección de Cultura de Microorganismos de Importancia Biotecnológica y Ambiental (CCMIBA) se cultivaron en medio líquido de Malta al 2% y los extractos obtenidos después del cultivo, se agregaron a cultivos celulares. La viabilidad celular se determinó cuantificando la absorbancia a 492 nm y 630 nm en espectrofotómetro expresados en porcentaje de viabilidad celular. Los resultados mostraron extractos fúngicos capaces de inhibir el crecimiento celular, sin embargo, también extractos fúngicos que aumentaron la proliferación celular, mediante el ensayo de MTT se obtuvo el valor de IC50 para los hongos: Fusarium sp. MD, Fusarium sp. BF, Fusarium sp. IT, Cladosporium sp. EB, Trichoderma sp. KQ, y para los hongos taxonómicamente no identificados: IL, CH, PK, CX y CE. Nuevos estudios están siendo realizados por el grupo para la caracterización taxonómica de los mismos siendo de suma importancia para la continuidad de los estudios. Los hongos estudiados, además de tener potencial para tratamiento tumoral pueden ser utilizados en el ámbito clínico para encontrar biomarcadores, blancos terapéuticos en protocolos de laboratorios y métodos de detección precoz mediante la actividad de aumento de la proliferación celular.
Actividad Insecticida, Repelente y Larvicida de Extractos Vegetales en el Control de Aedes Aegypti: una Revisión Bibliográfica
(2021) Lima Bejar, Dianeth Sara; Orientação
El dengue junto a otras arbovirosis, es transmitida en las Américas principalmente a través del mosquito Aedes aegypti y actualmente representa uno de los más grandes problemas de salud pública siendo endémica en más de 30 países incluídos países latinoamericanos. Frente a la falta de tratamientos específicos para tratar las infecciones de dengue, los esfuerzos se han focalizado en el control del vector, aplicando diversas estrategias de combate, incluídas la aplicación de insecticidas y larvicidas para eliminar directamente la población de mosquitos, así como el uso de repelentes, como estrategia de protección individual. Los relatos de resistencia al combate químico por productos comerciales sintéticos, ha despertado la preocupación de los investigadores y población en general, además de los daños al medio ambiente y a la salud de las personas, esto justifica la demanda por la búsqueda de fuentes naturales como estrategias alternativas de control. El presente trabajo pretende discutir mediante las informaciones encontradas en la literatura, sobre las plantas y compuestos que presentaron mayores índices de eficacia para el control del vector. También se analizaron los métodos utilizados para evaluar la actividad insecticida, larvicida y de repelencia de diferentes extractos y aceites esenciales de plantas para el control de A. aegypti. La metodología de este estudio consistió en una revisión bibliográfica de publicaciones científicas indexadas sobre diferentes extractos o aceites esenciales de plantas con actividad insecticida, larvicida o de repelencia. Se tomaron valores de eficacia basados en el tipo de actividad descrita, principales compuestos presentes y metodología de experimentación. Los datos obtenidos, permitieron confirmar el potencial biotecnológico de los compuestos presentes en las plantas para el control del mosquito. Además se realizó un análisis sobre las dificultades encontradas al comparar los índices de eficacia para cada estudio revisado, lo que permitió evidenciar la necesidad de estandarización de la metodología de los experimentos realizados. De la misma manera, se vio la necesidad de definir los índices de eficacia para cada actividad a ser evaluada, con el fin de facilitar la evaluación comparativa de los diferentes extractos y/o aceites esenciales, reconocer sus principales compuestos y pasarlos a la fase aplicada en campo.
Avaliação em Larga Escala de uma Vacina Bivalente Contra Infecção por Aeromonas Hydrophila e Streptococcus Agalactiae em Tilápias-do-Nilo (Oreochromis niloticus)
(2021) Santos, Angelo Gabriel Vidal dos; Viana, Kelvinson Fernandes;
A tilapicultura brasileira se expandiu nas últimas décadas e se consolidou como principal atividade aquícola do país. Em 2020 a produção nacional foi de cerca de 500.000 toneladas de tilápia, sendo o Paraná o maior produtor desta espécie, com destaque para a região Oeste do estado. O crescimento da atividade exigiu a necessidade da incorporação de tecnologias para o aumento da produtividade e da qualidade do produto nacional. Este trabalho teve como objetivo o desenvolvimento de uma vacina bivalente para o controle de Streptococcus agalactiae e Aeromonas hydrophila e avaliar a efetividade na produção de tilápias em tanques-rede. A vacina foi produzida utilizando cepas isoladas em cultivos no lago de Itaipu. Na formulação foram utilizados o antígeno bacteriano inativado por formalina na concentração de 1x107 células/dose para cada bactéria e o adjuvante oleoso MONTANIDE™ ISA. No teste em larga escala foram utilizados 12000 animais, com peso variando entre 80 e 120 g, divididos em dois grupos, controle e vacinado, alocados em 8 tanques-rede com densidade de 150 animais/m3 e alimentados 3 vezes por dia. Para a vacinação, os animais foram sedados em solução contendo eugenol na concentração de 100 mg/L. A vacina foi administrada via intraperitoneal no volume de 50 μL. O acompanhamento do peso dos animais foi feito mensalmente. Os resultados mostram a redução da mortalidade no grupo vacinado (3,72%) em relação ao controle (8,70%), além disso, os animais vacinados tiveram um ganho de massa de aproximadamente 21% a mais que o controle. Assim, a vacina bivalente oleosa desenvolvida neste trabalho foi capaz de reduzir a mortalidade, com uma eficácia de 57,17%, e melhorar a conversão alimentar dos animais.
Metabolômica das Fezes de Touros Nelore submetidos à Seleção
(2021) Ibarra, Karina Gisselle; Orientação
O objetivo do estudo foi investigar as diferenças nos perfis metabólicos das fezes de touros selecionados por meio do índice de seleção. Cento e oito touros da raça Nelore foram confinados com a mesma dieta durante 77 dias. O perímetro escrotal de cada animal foi obtido, o sêmen foi coletado e submetido ao espermograma. As amostras de fezes foram coletadas para os ensaios de metabolômica. O índice de seleção foi constituído pelas características de volume do ejaculado, turbilhonamento, motilidade, vigor, concentração, anormalidades e perímetro escrotal. Com base no índice de cada touro, dois grupos contrastantes foram selecionados para análise metabolômica: touros superiores (3,4 ± 0,2; n = 5) e touros inferiores (2,1 ± 0,2; n = 5). Os metabólitos das fezes foram extraídos e os espectros obtidos por meio da análise de Ressonância Magnética Nuclear (1H RMN). Os dados obtidos foram analisados por meio de estatística uni e multivariada para a identificação dos metabólitos diferencialmente expressos. No presente estudo foram observados 54 metabólitos, dos quais 23 foram diferencialmente expressos entre os grupos experimentais de touros com índice de seleção superior e inferior (P<0,05). Os touros com índice superior apresentaram concentrações significativamente maiores (P<0,05) dos compostos acetato, butirato, lactato, piruvato, 3-hidroxiisobutirato, 4-hidroxifenilacetato, histidina, cadaverina, hipoxantina e imidazol. No entanto, nesse grupo experimental foram observadas concentrações significativamente menores (P<0,05) dos metabólitos citrato, formato, isobutirato, isovalerato, fenilacetato, 3-hidroximandelato, glicina, lisina, treonina, glicose, ribose, 1,3-diidroxiacetona e isopropanol. O PCA e PLS-DA mostraram que o perfil de metabólito em touros com índice de seleção superior foi diferente dos touros com índice de seleção inferior. As principais vias metabólicas (maior fator de impacto e P<0,05), observadas foram metabolismo da beta alanina, metabolismo de glicina, serina e treonina, metabolismo do piruvato, metabolismo de glicolipídeos e metabolismo da histidina. Em conclusão, os dados deste estudo piloto mostraram que a impressão digital dos metabólitos das fezes pode ser uma metodologia a ser utilizada no futuro para diferenciar touros superiores e inferiores para reprodução.
Enzimas Lignocelulolíticas e seu Potencial para Tratamento de Biomassa: uma Revisão
(2021) Fernandes, Ana Leticia; Orientação
As inovações no ramo industrial buscam por alternativas que reduzam seu impacto ambiental e prejuízos causados aos diversos ecossistemas. A utilização de complexos enzimáticos em substituição aos processos tradicionais tem despertado o interesse de pesquisadores devido sua especificidade e ampla aplicação em processos industriais gerando uma cadeia produtiva mais sustentável. O mercado mundial de enzimas mostra um crescimento acelerado e é estimado que alcance em torno de 6,3 bilhões de dólares em 2024. Estes dados apontam um caminho promissor para projetos direcionados à biotecnologia, tanto para a pesquisa em âmbitos acadêmicos como industriais. A aplicação de enzimas para biodegradação de materiais lignocelulósicos também tem ganhado destaque visto que o aproveitamento da biomassa residual vem tornando-se um forte aliado ao desenvolvimento circular. Dessa forma o seguinte trabalho teve como objetivo realizar uma análise do potencial biotecnológico de enzimas lignocelulolíticas para o tratamento de biomassa. Para isso, foi realizado um levantamento de publicações a partir das plataformas Science Direct e Portal de Periódicos Capes. Este estudo identificou os métodos de aproveitamento de biomassa assim como técnicas de otimização do processo possibilitando observar as limitações e avanços na área.
Evaluacion de los Efectos Antitumorales de Genipa Americana
(2021) Regalado, Johana; Maria Ruiz , Jorge Luís
El cáncer es una patología dada por el crecimiento exacerbado de algunas células, que son expuestas a agentes carcinogenicos, lo que termina generando masas o tumores. El cáncer genera un fuerte impacto a nivel social, psicológico, físico y económico, afectando a la persona que lo padece y al sistema de salud pública. Por esta razón se buscan nuevas alternativas de tratamiento que disminuya los costos y sean más efectivos, una opción promisoria son los aceites esenciales de plantas medicinales, debido a que reúnen las diversas moléculas de las plantas, que han demostrado tener actividad biológica, ya que son liposolubles, permitiendo que tengan un efecto sobre las células. La G. americana o conocida comúnmente como “Jenipapo” es una planta encontrada en América Central y América del Sur, y el aceite esencial que se consigue de esta planta presenta alto contenido de compuestos, que han comprobado tener actividad farmacológica, anti angiogénica, antitumoral y antioxidante, qué inducen la apoptosis o la muerte de células tumorales. Por ello este trabajo busca comprobar el efecto qué tiene una muestra de aceite esencial de jenipapo sobre las células tumorales específicamente las células A549 (carcinoma pulmonar, ATCC CCL-185), Para ello se descongelo y cultivo los linajes celulares A549, U-87 (astrocitoma de glioblastoma humano, ATCC HTB-14™) y Mia-Paca 2 (carcinoma pancreático, ATCC CRL-1420) en frascos para cultivo celular de 75 cm2, con Medio Esencial Mínimo (DMEN) que contenía 10% de penicilina y estreptomicina, y 10% de suero fetal bovino (SFB), se dejaron crecer en la estufa a 37 ºC, con CO2, supervisando el crecimiento cada 3 días. Se hizo tinción de fluorescencia usando DAPI, para determinar sí había contaminación, se hizo pruebas de viabilidad celular por conteo celular y MTT para evaluar la capacidad citotóxica del aceite esencial de jenipapo sobre las células, y los datos obtenidos se analizaron usando GraphPad Prism 5 ®. A pesar de que se buscó usar los tres linajes celulares, esto no fue posible, y solo se obtuvo resultados para las células A549, y se determinó que el IC50 del aceite esenciales de G. americana sobre las células A549 es de 0.5026 v/v, lo cual puede estar asociado a los tipos de hexanol, hexanal, hidroxitolueno butilado y benzoato de hexilo, encontrados en la muestra de aceite que se usó.

Navegar

Navegando TCC - Biotecnologia por Data de Publicação

Resultados por página

Opções de Ordenação