Descrição dos estágios iniciais do desenvolvimento embrionário do carrapato do cão, (Acari: Ixodidae) Rhipicephalus linnaei (Audouin, 1826)
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2026-01-27
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Resumo
O desenvolvimento embrionário de carrapatos constitui uma área ainda pouco explorada dentro do grupo dos aracnideos, especialmente quando se trata de espécies recentemente redefinidas taxonomicamente, como Rhipicephalus linnaei. Reconhecida como a linhagem tropical do complexo Rhipicephalus sanguineus sensu lato, essa espécie possui grande relevância médico-veterinária devido ao seu papel como ectoparasita de cães e vetor de agentes como Ehrlichia canis, Babesia vogeli e Hepatozoon canis. Apesar do crescente número de estudos sobre biologia, ecologia e distribuição de Ixodidae, estudos relacionados à embriogênese permanecem limitados. Neste estudo, foram analisados embriões de R. linnaei com 4 e 5 dias de desenvolvimento, a fim de caracterizar a organização nuclear durante os estágios iniciais do embrião. Fêmeas ingurgitadas foram mantidas em condições controladas, e seus ovos foram submetidos a protocolo de descorionização baseado em Friesen et al. (2015), seguido de permeabilização e marcação nuclear com DAPI. As amostras foram avaliadas em microscopia de fluorescência para verificar a integridade estrutural dos embriões e a distribuição dos núcleos. Os resultados obtidos mostraram que, no 4º dia de desenvolvimento, os embriões apresentaram grande quantidade de núcleos distribuídos de forma relativamente homogênea no citoplasma, além de grânulos de vitelo bem definidos e variáveis em tamanho. No 5º dia, observou-se aumento significativo na quantidade de núcleos e início de agrupamento nuclear, sugerindo a transição para fases mais avançadas, e dando início aos processos preparatórios para a formação do blastoderma. A ausência visível de grânulos de vitelo nesse estágio pode indicar reorganização citoplasmática à medida que o desenvolvimento progride. Alguns embriões apresentaram falhas na marcação fluorescente ou remoção parcial do córion, resultando em distribuição nuclear irregular e estruturas disformes, o que evidencia limitações técnicas em protocolos de lixiviação e permeabilização, especialmente quando aplicados a embriões de idades variáveis. Tais dificuldades já foram relatadas em estudos com outras espécies de carrapatos, reforçando a necessidade de padronização aprimorada para análises embrionárias comparativas. De modo geral, os padrões observados confirmam que R. linnaei apresenta dinâmica embrionária compatível com outros quelicerados. A caracterização desses estágios iniciais contribui para preencher lacunas no entendimento da embriogênese do grupo e fornece informações essenciais para futuras investigações envolvendo morfogênese, biologia celular, evolução e potenciais intervenções no ciclo de vida de carrapatos.
Resumen
El desarrollo embrionario de los garrapatos constituye un área aún poco explorada dentro del grupo de los arácnidos, especialmente cuando se trata de especies recientemente redefinidas desde el punto de vista taxonómico, como Rhipicephalus linnaei. Reconocida como la linaje tropical del complejo Rhipicephalus sanguineus sensu lato, esta especie posee una gran relevancia médico-veterinaria debido a su papel como ectoparásito de perros y vector de agentes como Ehrlichia canis, Babesia vogeli y Hepatozoon canis. A pesar del creciente número de estudios sobre la biología, ecología y distribución de los Ixodidae, las investigaciones relacionadas con la embriogénesis siguen siendo limitadas. En este estudio se analizaron embriones de R. linnaei con 4 y 5 días de desarrollo, con el objetivo de caracterizar la organización nuclear durante las etapas iniciales del embrión. Las hembras ingurgitadas se mantuvieron en condiciones controladas, y sus huevos fueron sometidos a un protocolo de descorionización basado en Friesen et al. (2015), seguido de permeabilización y marcación nuclear con DAPI. Las muestras se evaluaron mediante microscopía de fluorescencia para verificar la integridad estructural de los embriones y la distribución de los núcleos. Los resultados obtenidos mostraron que, en el cuarto día de desarrollo, los embriones presentaron una gran cantidad de núcleos distribuidos de manera relativamente homogénea en el citoplasma, además de gránulos de vitelo bien definidos y variables en tamaño. En el quinto día se observó un aumento significativo en el número de núcleos y el inicio del agrupamiento nuclear, lo que sugiere la transición hacia fases más avanzadas del 7 Versão Final Homologada 24/01/2026 15:51 desarrollo y el comienzo de los procesos preparatorios para la formación del blastodermo. La ausencia visible de gránulos de vitelo en esta etapa puede indicar una reorganización citoplasmática a medida que el desarrollo progresa. Algunos embriones presentaron fallas en la marcación fluorescente o una remoción parcial del corion, lo que resultó en una distribución nuclear irregular y en estructuras deformes, evidenciando limitaciones técnicas en los protocolos de lixiviación y permeabilización, especialmente cuando se aplican a embriones de diferentes edades. Estas dificultades ya han sido reportadas en estudios con otras especies de garrapatos, lo que refuerza la necesidad de una estandarización mejorada para análisis embrionarios comparativos. En general, los patrones observados confirman que R. linnaei presenta una dinámica embrionaria compatible con la de otros quelicerados. La caracterización de estas etapas iniciales contribuye a llenar vacíos en la comprensión de la embriogénesis del grupo y proporciona información esencial para futuras investigaciones relacionadas con la morfogénesis, la biología celular, la evolución y posibles intervenciones en el ciclo de vida de los garrapatos.
Abstract
Embryonic development in ticks remains an understudied area within arachnid biology, particularly regarding species that have recently undergone taxonomic redefinition, such as Rhipicephalus linnaei. Recognized as the tropical lineage of the Rhipicephalus sanguineus sensu lato complex, this species holds substantial medical and veterinary importance due to its role as an ectoparasite of dogs and vector of pathogens such as Ehrlichia canis, Babesia vogeli, and Hepatozoon canis. Despite the increasing number of studies on Ixodidae biology, ecology, and distribution, research focused on embryogenesis remains limited. In this study, R. linnaei embryos at 4 and 5 days of development were analyzed with the aim of characterizing nuclear organization during the early developmental stages. Engorged females were maintained under controlled laboratory conditions, and their eggs were subjected to a decortication protocol based on Friesen et al. (2015), followed by permeabilization and nuclear staining with DAPI. Samples were examined using fluorescence microscopy to assess structural integrity and nuclear distribution. The results demonstrated that embryos at 4 days of development exhibited numerous nuclei distributed relatively homogeneously throughout the cytoplasm, along with well-defined yolk granules of variable sizes. By the 5th day, a marked increase in nuclear number and the onset of nuclear clustering were observed, indicating progression toward more advanced developmental phases and the initial steps leading to blastoderm formation. The absence of visible yolk granules at this stage suggests cytoplasmic reorganization as development advances. Some embryos showed incomplete fluorescent staining or partial chorion removal, resulting in irregular nuclear distribution and distorted structures. These findings highlight technical limitations associated with decortication and permeabilization procedures, 6 Versão Final Homologada 24/01/2026 15:51 particularly when applied to embryos of varying developmental ages—challenges previously reported in studies involving other tick species. Overall, the observed patterns confirm that R. linnaei exhibits an embryonic dynamic consistent with other chelicerates. The characterization of these early stages helps fill existing gaps in the understanding of embryogenesis in ticks and provides essential information for future investigations involving morphogenesis, cell biology, evolution, and potential interventions in the tick life cycle.
Descrição
Trabalho de Conclusão de Curso apresentado ao Instituto Latino-Americano de Ciências da Vida e Natureza da Universidade Federal da Integração Latino-Americana, como requisito parcial à obtenção do título de Bacharel em Ciências Biológicas – Ecologia e Biodiversidade.
Palavras-chave
aracnídeos, carrapatos, desenvolvimento embrionário, embriogênese