TCC - Biotecnologia

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ILACVN - Centro Interdisciplinar de Ciências da Vida - Bacharelado em Biotecnologia

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Navegando TCC - Biotecnologia por Assunto "2D-PAGE"

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    Perfil Proteômico de Linhagem Celular do Adenocarcinoma Ductal Pancreático Humano (MIA PaCa-2)
    (2022) Martins, Camila Eduarda Alves; Orientação; Malheiros, Jessica Moraes
    O câncer de pâncreas é um tipo de doença extremamente agressiva e de difícil diagnóstico. Essa enfermidade apresenta como único tratamento definitivo a cirurgia de retirada do tumor. No entanto, devido ao diagnóstico tardio, menos de 5% dos pacientes conseguem realizar a cirurgia de forma efetiva. Desse modo, se tornam necessários estudos que abordem a temática câncer no intuito de obter o diagnóstico precoce da doença. Nesse contexto, a presente pesquisa teve como objetivo obter o perfil proteômico da linhagem celular de adenocarcinoma ductal pancreático (MIA PaCa-2) e linhagem de fibroblasto pulmonar (MRC-5). As linhagens celulares foram obtidas através do cultivo em 37 °C a 5% CO por 24 e 48h em meio DMEM completo. Posteriormente, foi realizada a extração das proteínas, separação em primeira dimensão por meio da focalização isoelétrica e a segunda dimensão em um gel de poliacrilamida (2D-PAGE). Os géis foram escaneados e a análise dos spots proteicos foi performada no software ImageMaster Platinum 7.0 (GE Healthcare). O cultivo celular de ambas as linhagens (MIA PaCa-2 e MRC-5) apresentaram os mesmos 13 spots de proteínas no tempo 24h. No entanto, dois spots foram específicos de cada linhagem nesse tempo de cultivo. O cultivo celular de 48h demonstrou maior número de spots proteicos, onde foram observados 77 e 72 spots para MIA Paca-2 e MRC-5, respectivamente. Dos 77 spots identificados na MIA PaCa-2, 7 merecem destaques, sendo 5, 1 e 1 sendo abundantes 3x, 3,5x e 4,5x, respectivamente. Dessa forma, 18 spots proteicos podem ser considerados como potenciais biomarcadores no diagnóstico do adenocarcinoma ductal pancreático.