BC - Dissertação
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Browsing BC - Dissertação by Author "Bernal, Suzan Prado Fernandes"
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Item Avaliação do potencial Biotecnológico de bactérias e fungos isolados de uma estação de tratamento de Industria Têxtil(2020) Bernal, Suzan Prado Fernandes; Passarini, Michel Rodrigo ZambranoOs micro organismos representam uma das fontes mais abundantes para obtenção de produtos naturais biologicamente ativos que podem ser aplicados nas mais diversas necessidades cotidianas. A alta flexibilidade, facilidade de cultivo e replicabilidade de bactérias e fungos são alguns dos fatores que tornam esses organismos imprescindíveis em diversos setores da indústria e também na busca por compostos medicinais que possam conter diferentes patologias. Os ambientes aquáticos são responsáveis por agregar uma alta variedade de comunidades microbianas e as indústrias que utilizam de recursos hídricos, quando presentes, tendem a influenciar diretamente no ciclo de vida desses organismos, especialmente quando há despejo de poluentes. A formação desse ambiente complexo favorece o crescimento e prevalência de linhagens microbianas mais adaptadas, capazes de produzir metabólitos secundários para sua sobrevivência. A indústria têxtil é uma grande representante da utilização de água para seus processamentos e normalmente tende a possuir efluentes tóxicos com alta concentração de corantes, metais pesados e temperatura elevada. Com esta perspectiva, o presente projeto buscou analisar 105 micro organismos, entre bactérias e fungos isolados de uma estação de tratamento de indústria têxtil quanto a sua capacidade de produção de enzimas para aplicações industriais como a celulase, enzimas com potencial aplicação na área médica como a lacase e as proteases (gelatinase e colagenase) e metabólitos com ação antimicrobiana. Os testes de triagem em placas foram realizados para produção das enzimas de interesse, celulase em meio com CMC, lacase em meio com guaiacol e protease em meio ágar leite. Os testes de atividade enzimática de celulase foram feitos com Azo CMcelulose, para lacase foi utilizado ABTS e para os testes de proteases foi utilizado Azo caseína, bem como ensaios do pefil proteico, zimografia e atividade genatinolítica e colagenolítica. Os testes de antimicrobianos foram realizados por técnicas de difusão em discos com extrato microbiano e a atividade mínima inibitória também foi testada. Os isolados de interesse biotecnológico foram caracterizados por métodos morfológicos e moleculares (Taxonomia Polifásica). Os resultados demonstraram atividades enzimáticas dos fungos e algumas bactérias, onde o isolado ITF10 Aspergillus sydowii apresentou 0,0275 U L 1 de atividade enzimática de lacase. A melhor produção de celulase foi 50,6927 U ml 1 pelo isolado ITF47 Aspergillus amoenus. A atividade mais alta de protease extracelular foi pela bactéria ITB47 Bacillus sp. (9,466 U/enz mg e intracelular 7,000 U/enz) pelo isolado ITF14 Penicillium sp. Foi observado a produção de uma enzima com atividade gelatinolítica do fungo ITF33 Sarocladium sp, a qual foi caracterizada com peso de 45 kDa MM. Para o mesmo fungo, a atividade colagenolítica foi demonstrada em 9,04 U / mg. No teste de MIC a menor concentração encontrada foi 0,03125mg (ITF30 Aspergillus sydowii), capaz de inibir o crescimento da E.coli e os isolados ITF13, ITF30 e ITF47 foram capazes de inibir todas as bactérias patogênicas testadas. Foram identificados 9 micro organismos por sequenciamento molecular e outros 17 por morfologia microscópica. A pesquisa de micro organismos recuperados de fontes diferenciadas, como de efluente da indústria têxtil, se mostrou promissora, tendo em vista a identificação de células produtoras de compostos de interesse com alta aplicabilidade na área industrial e médica.