Navegando por Autor "Zepeda Rojas, Bruno Javier"
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Item Análises de DNA extracelular em pacientes com doença de Alzheimer e efeito de fitocanabinóides na modulação de redes extracelulares de neutrófilos e na integridade de células endoteliais da barreira hematoencefálica.(2026-06-16) Zepeda Rojas, Bruno Javier; OrientaçãoA doença de Alzheimer (DA) é uma patologia neurodegenerativa caracterizada por um quadro de neuroinflamação crônica, no qual neutrófilos migram para o sistema nervoso central e liberam redes extracelulares de neutrófilos (NETs), contribuindo para danos ao endotélio cerebral e ao parênquima. Considerando o papel central das células endoteliais da barreira hematoencefálica (BHE) e o potencial modulador dos fitocanabinóides sobre células imunes, este estudo avaliou os efeitos do canabidiol (CBD) e o tetrahidrocanabinol (THC) da Cannabis sativa em neutrófilos e em células endoteliais cerebrais humanas (HBMECs), assim como em biomarcadores de pacientes com DA. Inicialmente, foram determinadas concentrações seguras para experimentos in vitro, sendo observado que o THC aumentou a atividade mitocondrial das HBMECs no ensaio de MTT. Em neutrófilos, tanto o CBD quanto o THC mostraram-se seguros; o CBD inibiu a liberação de NETs em neutrófilos de indivíduos saudáveis, enquanto o THC exerceu o efeito oposto em neutrófilos de pacientes com DA, aumentando a formação de NETs. Adicionalmente, a quantificação de DNA extracelular (cfDNA) (molécula importante na estrutura das NETs) em amostras de líquido cefalorraquídeo (LCR) e plasma de pacientes com DA revelou níveis mais elevados no LCR em comparação ao plasma. Estas concentrações de cfDNA não se correlacionam com marcadores inflamatórios ou clássicos da DA. O cfDNA do LCR apresentou uma tendência de correlação negativa com o desempenho cognitivo, enquanto o cfDNA plasmático demonstrou uma relação inversa a esta. Em conjunto, os resultados destacam a complexidade dos efeitos dos fitocanabinóides sobre neutrófilos em diferentes contextos fisiopatológicos e reforçam a relevância das HBMECs, das NETs e do cfDNA como alvos e potenciais biomarcadores no estudo da DA.Item Análisis del Efecto in Vitro de Extractos de Cannabinoides en Fibroblastos MRC-5(2023) Zepeda Rojas, Bruno JavierLa cicatrización es uno de los procesos de reparación más importantes del cuerpo, pues permite que el organismo se cure de lesiones que podrían volverse perjudiciales para la integridad del individuo. Los fibroblastos son células esenciales en el proceso de cicatrización debido a su rol en la síntesis de fibras de colágeno y otras proteínas de la matriz extracelular. Existe un creciente interés en el desarrollo de nuevas terapias que puedan auxiliar en la curación de heridas, pues algunos tratamientos convencionales generan efectos secundarios indeseados o no poseen gran efectividad. La planta Cannabis sativa es una de las más estudiadas actualmente, gracias a su gran variedad de propiedades medicinales. Se ha comprobado que los cannabinoides, moléculas producidas por la planta, poseen un alto potencial para inducir diversos efectos en las células del cuerpo humano; esto debido a la presencia del sistema endocannabinoide en tejidos a lo largo del organismo. El efecto de estos compuestos en fibroblastos ha sido poco estudiado, por lo que en el presente trabajo se analizó el efecto in vitro de un extracto de THC/CBD en fibroblastos MRC-5. Para esto, se llevó a cabo un ensayo de citotoxicidad con MTT, se elaboró una curva de crecimiento celular y un ensayo de migración. Los resultados del estudio revelaron que el extracto no presenta toxicidad en las células, factor importante para su utilización en el desarrollo de terapias. A pesar de que, estadísticamente, no se encontraron diferencias significativas en la tasa de proliferación celular cuando tratadas con el extracto, en todos los experimentos realizados los fibroblastos presentaron tendencia a una mayor proliferación. Estos descubrimientos son promisorios, pues abren las puertas a posteriores investigaciones donde se pueda comprobar de manera más completa dicho efecto en las células; abriendo el camino de posibles nuevas terapias para el tratamiento de heridas.