Padronização do protocolo de ativação do biomaterial derivado do plasma rico em plaquetas congelado canino
Nenhuma Miniatura disponível
Data
2023
Autores
Novaes, Kauana Magagnin de
Título da Revista
ISSN da Revista
Título de Volume
Editor
Resumo
O plasma rico em plaquetas (PRP) emerge como um subproduto sanguíneo que captura a atenção da comunidade de saúde, sobretudo devido ao seu notável potencial na regeneração tecidual e cicatrização de lesões, atributos que emanam do seu elevado conteúdo de fatores de crescimento. Na área da medicina veterinária, os bancos de sangue frequentemente geram uma grande quantidade de PRP com aplicação clínica limitada, resultando em seu armazenamento em estado congelado e subsequente descarte. O propósito deste estudo consistiu em avaliar a aptidão do PRP congelado para a produção de um biomaterial com capacidade de suporte celular, que pudesse ser empregado na manutenção de células-tronco mesenquimais caninas. A abordagem metodológica empregada se pauta na ativação do PRP por meio de ciclos de congelamento e descongelamento, bem como ensaios voltados para a formação de coágulos, desencadeados tanto por energia mecânica quanto pela introdução de agentes coagulante, juntamente com a análise do coágulo a partir da inclusão de células-tronco mesenquimais derivadas do tecido adiposo canino (ASCs). A posterior avaliação do coágulo foi conduzida por de microscopia ótica, de fluorescência e eletrônica de varredura. O coágulo derivado do plasma canino alcançou configuração eficiente a partir da adição de CaCl2, e foi induzido pela incorporação do meio de cultura DMEM e pelo cultivo à temperatura fisiológica de 37oC. O biomaterial resultante foi submetido a análises sob microscopia ótica, com coloração H&E (hematoxilina e eosina) e azul de bromofenol, revelando a presença de células dentro da estrutura fibrinosa no interior do coágulo. A aplicação de ASCs na coagulação do PRP foi analisada por microscopia de fluorescência, mediante o uso de corantes Faloidina e DAPI, permitindo a visualização das células entrelaçadas na tridimensionalidade da estrutura do coágulo. Por fim, a análise sob microscopia eletrônica de varredura (MEV) envolveu a fixação, desidratação e secagem do biomaterial, seguido pelo processo de metalização em sputtering, possibilitando a observação detalhada de sua estrutura macromolecular. Em suma, constata-se que o biomaterial obtido a partir do plasma rico em plaquetas canino congelado ostenta um notável potencial como matriz para o cultivo tridimensional de células.
Descrição
Trabalho de Conclusão de Curso apresentado ao Instituto Latino-Americano de Ciências da Vida e da Natureza da Universidade Federal da Integração Latino-Americana, como requisito parcial à obtenção do título de Bacharel em Biotecnologia.
Palavras-chave
PRP; fibrina; biomaterial; microscopia; padronização.