Barros, Maria Gabriela Azevedo2025-05-082025-05-082025-05-08https://dspace.unila.edu.br/handle/123456789/9093Tese apresentada ao Programa de Pós-Graduação Interdisciplinar em Energia e Sustentabilidade da Universidade Federal da Integração Latino-Americana, como requisito parcial à obtenção do título de Doutor em Energia e Sustentabilidade.O aumento da população mundial e do consumo traz uma série de desequilíbrios ambientais, impactando as futuras gerações. Com a finalidade de diminuir esses danos, rumo a um desenvolvimento mais sustentável, foram propostas diversas metas e boas práticas, por exemplo, a agenda 2030 pela Organização das Nações Unidas (ONU). Partindo do ideal de minimização dos danos ambientais relacionados aos processos industriais e a aplicação os princípios da química verde, o presente trabalho busca prospectar atividades enzimáticas em fungos endofíticos isolados de plantas nativas do oeste paranaense para biotransformação de fármacos. Desta forma, foi realizado o isolamento de 39 fungos oriundos da árvore Cabralea canjerana e 130 da Guarea kunthiana. Os fungos isolados foram separados em grupos de acordo com as características morfológicas, e, em uma triagem inicial, para avaliar a tolerância dos fungos à exposição de fármacos, 10 das 53 morfo-espécies avaliadas apresentaram resultados acima de 20 % em pelo menos um dos 6 tratamentos, sendo assim, consideradas promissoras, 3 da C. canjerana e 7 da G. kunthiana. A identificação dos fungos promissores foi realizada por biologia molecular pelo método Sanger, utilizando a amplificação nas regiões de ITS1 e ITS4, indicando que dos 10 fungos selecionados previamente, 8 eram ascomicetos, e 2 eram do tipo basidiomicetos. Posteriormente, os isolados selecionados foram submetidos a triagem enzimática. Os resultados obtidos mostram que os isolados possuem um perfil enzimático diverso; com as cepas isoladas da C. canjerana foram melhores para atividade potencial das oxidases - Lac, MnP e LiP. Ao passo que os da G. kunthiana apresentaram um perfil mais amplo, com destaque para o isolado Colletotrichum sp. mgk_C3_9 que se mostrou ativo para a maioria dos ensaios enzimáticos, e seletivo no ensaio de lacase com o naftol, no qual oxidou apenas o 𝛽-naftol. Por fim, o fármaco ibuprofeno foi submetido à reação de biotransformação, sendo que o fungo Colletotrichum sp. mgk_C3_9 promoveu a conversão de 55,7 % do fármaco em 2-hidroxi-ibuprofeno após 96 h de reação, confirmando o potencial biocatalítico do fungo avaliado. De modo geral, os fungos investigados apresentaram resultados promissores para enzimas oxigenases e lipases. Este trabalho contribui para a prospecção de novos biocatalisadores e reforça a importância da biodiversidade microbiana regional na busca por soluções inovadoras e ambientalmente responsáveis para a indústria, contribuindo com o desenvolvimento da agenda 2030. Resumen El aumento de la población mundial y el consumo trae una serie de desequilibrios ambientales que afectan a las futuras generaciones. Con el objetivo de reducir estos daños hacia un desarrollo más sostenible, se han propuesto varias metas y buenas prácticas, por ejemplo, la Agenda 2030 de las Naciones Unidas (ONU). Partiendo del ideal de minimizar los daños ambientales relacionados con los procesos industriales y la aplicación de los princípios de la química verde, el presente trabajo busca explorar las actividades enzimáticas em hongos endofíticos aislados de plantas nativas del oeste de Paraná para la biotransformación de fármacos. Así, se aislaron 39 hongos del árbol Cabralea canjerana y 130 de Guarea kunthiana. Los hongos aislados se separaron en grupos según características morfológicas y, en un cribado inicial para evaluar la tolerancia de los hongos a la exposición de fármacos, 10 de las 53 morfo-especies evaluadas mostraron resultados por encima del 20 % en al menos uno de los 6 tratamientos, siendo consideradas prometedoras, 3 de C. canjerana y 7 de G. kunthiana. La identificación de los hongos prometedores se llevó a cabo mediante biología molecular utilizando el método Sanger, utilizando la amplificación en las regiones ITS1 e ITS4, indicando que de los 10 hongos previamente seleccionados, 8 eran ascomicetos y 2 eran basidiomicetos. Posteriormente, los aislados seleccionados fueron sometidos a cribado enzimático. Los resultados obtenidos muestran que los aislados tienen un perfil enzimático diverso; con cepas aisladas de C. canjerana siendo mejores para la actividad potencial de oxidasa - Lac, MnP y LiP. Mientras que los de G. kunthiana presentaron un perfil más amplio, con énfasis en el aislado Colletotrichum sp. mgk_C3_9 que fue activo para la mayoría de los ensayos enzimáticos y selectivo en el ensayo de lacasa com naftol, donde oxidó solo el 𝛽-naftol. Finalmente, el fármaco ibuprofeno fue sometido a una reacción de biotransformación con el hongo Colletotrichum sp. mgk_C3_9 promoviendo la conversión del 55.7 % del fármaco en 2-hidroxi-ibuprofeno después de 96 horas de reacción, confirmando el potencial biocatalítico del hongo evaluado. En general, los hongos investigados mostraron resultados prometedores para las enzimas oxidasa y lipasa. Este trabajo contribuye a la exploración de nuevos biocatalizadores y refuerza la importância de la biodiversidad microbiana regional en la búsqueda de soluciones innovadoras y ambientalmente responsables para la industria, contribuyendo al desarrollo de la agenda 2030.viopenAccessfungosbiologia moleculardesenvolvimento sustentáveloeste paranaenseThesis