Análise de Proteína Sexo-Específica de Membrana de Células do Sangue, Provenientes do Cromossomo “W” De Gallus Gallus

Abstract

Nos últimos anos, a sexagem de animais e aves no Brasil e no mundo apresentou um grande destaque, principalmente no setor comercial, assim como na preservação. Apesar da grande importância da sexagem em aves, ainda a principal metodologia empregada é a realização do PCR (reação em cadeia da polimerase). Essa metodologia utiliza amostras de material biológico das aves enviadas via correio do criadouro até empresas de prestação de serviços, demandando tempo e burocracia. Diante deste cenário, o presente trabalho buscou realizar um levantamento de proteínas sexo-específicas em Gallus gallus presentes na membrana de células sanguíneas, utilizando diferentes ferramentas de bioinformática, visando a elaboração de teste de sexagem caseiro, a partir de análise de aglutinação usando amostras de sangue. Utilizando ferramentas de bioinformática gratuitas, como Ensembl, UniProt, Phobius e NCBI, bem como levantamento através da literatura, foram eleitas 11 proteínas de interesse buscando pelas seguintes características ideiais: (i) localização no cromossomo W; (ii) presença de domínio transmembrana e/ou presença na membrana celular; (iii) presença em hemácias ou glóbulos brancos, (iv) porcentagem baixa de homologias com outras sequências proteicas e entre sequências de mRNA de galinha, (v) porcentagem alta de homologia com sequências ortólogas de outras aves. A proteína predita 2 (Ensembl: ENSGALG00000047434) foi escolhida como a mais promissora para uso em técnicas de sexagem, por apresentar as seguintes características: i) presença no cromossomo W; (ii) proteína integral de membrana; (iii) possui no máximo 41,07% de homologia com outras proteínas da galinha; (iv) possui boa homologia (89,9%) com outras aves. Considerando o potencial de uso da proteína 2, foram desenhados pares de primers específicos, com base na sequência de mRNA de referência. Os próximos passos do presente projeto incluirão a extração de sangue de aves, preparo de amostras de RNA/cDNA e RT-PCR utilizando os primers específicos, para verificação da expressão do gene da proteína 2 em células do sangue de diferentes espécies de aves.